【摘 要】
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为了研究山羊痘病毒RNA聚合酶亚基RPO30蛋白功能,构建了其原核表达质粒pET28a-RPO30和pGEX-6p-1-1RPO30,并进行了诱导表达和纯化.将纯化的His-RPO30蛋白免疫BALB/c小鼠,并将
【机 构】
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中国检验检疫科学研究院动物检验与检疫研究所,北京100176
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为了研究山羊痘病毒RNA聚合酶亚基RPO30蛋白功能,构建了其原核表达质粒pET28a-RPO30和pGEX-6p-1-1RPO30,并进行了诱导表达和纯化.将纯化的His-RPO30蛋白免疫BALB/c小鼠,并将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,通过筛选得到了能够稳定分泌与RPO30蛋白特异性反应的单克隆抗体的杂交瘤细胞株7E5.对该单克隆抗体的轻链和重链类型进行测定,发现其重链为IgG2b亚型,轻链为κ亚型.经测定,单克隆抗体7E5的腹水效价可达1:128 000.RPO30单克隆抗体的制备将为该蛋白功能的研究提供有力工具.
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