【摘 要】
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目的研究骨髓间充质干细胞(MSC)中转化生长因子β1(TGF-β1)与Smad3的表达下调与再生障碍性贫血(再障)发生的可能关系。方法取20例重型再障患者骨髓MSC,分离制备出Flk1+CD34
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目的研究骨髓间充质干细胞(MSC)中转化生长因子β1(TGF-β1)与Smad3的表达下调与再生障碍性贫血(再障)发生的可能关系。方法取20例重型再障患者骨髓MSC,分离制备出Flk1+CD34–MSC后进行以下试验:①体外定向诱导MSC向脂肪细胞分化,倒置显微镜观察成脂分化情况,油红O染色法鉴定脂肪细胞,用实时荧光定量PCR检测分化过程中脂蛋白酯酶(LPL)基因的表达;②用蛋白质印迹法检测MSC中TGF-β1及Smad3的表达,用ELISA检测MSC分泌TGF-β1的能力;③观察不同剂量(0、5、10、15、20ng/ml)TGF-β1对再障患者骨髓MSC成脂分化和增殖的影响。以7名健康成人的骨髓MSC相应检测为对照。结果再障患者骨髓MSC经4d培养后即分化为脂肪细胞,而健康成人骨髓MSC中仅见少量细胞出现脂肪滴。再障患者MSC培养4和8d时LPL基因表达水平分别为0.091±0.028、0.142±0.033,均高于健康成人骨髓MSC(分别为0.021±0.011及0.049±0.010,均P<0.01);而TGF-β1及Smad3表达水平明显低于健康成人骨髓MSC,TGF-β1分泌水平(3.4μg/L±0.9μg/L)也明显低于健康成人骨髓MSC(11.6μg/L±1.2μg/L,P<0.01)。在向脂肪细胞分化过程中,仅加入5ng/ml的TGF-β1即可明显抑制再障患者骨髓MSC向脂肪细胞定向诱导分化,同时促进其增殖。结论再障患者骨髓MSC中TGF-β1及Smad3表达水平的显著下调可能参与了再障的部分发病环节。
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