sⅡ系列缺失启动子载体的构建

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为检测新型sⅡ根部特异启动子的功能,采用PCR的方法,扩增胡萝卜根部特异启动子sⅡ基因的启动子序列,得到该启动子-650bp和-1000bp区域片段。在启动子片段的5’和3’端分别引入了克隆所需的限制性酶切位点,分别定向克隆到经改造的质粒载体pBI121和pBITM2MARⅡ中,取代原有的组成型启动子CaMV35S,获得了四个含有胡萝卜根部特异启动子sⅡ基因不同缺失片段区域与GUS报告基因的融合检测载体。该系列载体通过农杆菌介导转入胡萝卜,检测sⅡ不同长度片段启动子在胡萝卜根部驱动报告基因的表达情况,分析
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