【摘 要】
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以龙眼成熟叶片为材料,利用实验室构建的龙眼转录组数据库,筛选出DlWRKY57基因cDNA序列,对其开放阅读框(ORF)进行克隆和生物信息学分析.结果表明,DlWRKY57基因ORF长度为894bp
【机 构】
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广西大学农学院,南宁,530004;广西壮族自治区农业科学院,广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室,南宁,530004;广西壮族自治区农业科学院园艺研究所,南宁,530007
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以龙眼成熟叶片为材料,利用实验室构建的龙眼转录组数据库,筛选出DlWRKY57基因cDNA序列,对其开放阅读框(ORF)进行克隆和生物信息学分析.结果表明,DlWRKY57基因ORF长度为894bp,编码297个氨基酸,此蛋白属于WRKY基因家族中的Ⅱa类,存在1个WRKY结合位点.通过生物信息学分析表明,该蛋白属于非跨膜亲水蛋白,预测定位于细胞核,存在45个氨基酸磷酸化位点.其二级结构由无规则卷曲、α-螺旋和延伸链构成,其中无规则卷曲为二级结构中最主要的结构元件,并且二级结构与三级结构预测结果高度一致.同源基因进化树分析表明该基因与木薯亲缘关系最近.以pMD18-T和pBI121载体为基础,成功构建了植物超表达载体pBI121-D1WRKY57,利用农杆菌花序法转化拟南芥,经PCR分子检测,获得含DlWRKY57基因的拟南芥植株,该超表达载体的遗传转化为DlWRKY57基因功能的深入研究提供依据.
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