白芨ISSR-PCR反应体系的建立及优化

• 作 者: 刘亭 金露 兰波 何彬 李靖 王永林
• 机 构: 贵阳医学院药学院,贵阳医学院民族药与中药开发应用教育部工程研究中心
• 出 处: 贵阳医学院学报
• 发表日期: 2014年4期
• 关键词: 白芨 简单序列重复区间扩增多态性技术 聚合酶链反应 体系优化 单因素试验 正交试验 Bletilla striata inter-simple sequenc

目的：建立并优化白芨ISSR-PCR反应体系,为白芨种质资源分子评价奠定技术基础.方法：应用单因素和正交试验研究ISSR-PCR反应体系中模板DNA、Mg2、引物、dNTP、BSA及Taq DNA聚合酶等6个主要成分对扩增结果的影响,优化出ISSR-PCR最佳反应体系.结果：优化后25 μL反应体系中含100 ng DNA模板、2.0 mmol/L Mg2＋、2.5 μmol/L引物、0.2 mmol/L dNTP浓度、3.75 g/L BSA及1.25 UTaq DNA聚合酶.结论：建立了适用于白芨的I