探讨N-乙酰氨基半乳糖转移酶14(GalNAc-T14)在胞内高表达促进多形性胶质母细胞瘤凋亡的机制。
方法培养多形性胶质母细胞瘤U87MG细胞株，构建的pcDNA3.1-T14质粒转染U87MG细胞，分为未处理组(Control组)、转染pcDNA3.1(＋)空载体组(NC1组)、转染pcDNA3.1-T14组(T组)，采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测GalNAc-T14、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、B细胞淋巴瘤/白血病-XL(bcl-XL)的表达、ERK1/2的磷酸化水平；采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双染色的方法，在流式细胞仪上检测细胞凋亡情况。应用SPSS 13.0统计软件分析，计量资料均值±标准差(Mean±SD)表示。
结果质粒转染前GalNAc-T14、ERK1/2、bcl-XL相对表达量为1，在U87MG细胞内高表达GalNAc-T14相对量为(15 393.43±30.35)。qPCR显示ERK1、ERK2、bcl-XL的mRNA相对表达量：NC1组为(0.98±0.12)、(0.91±0.05)、(0.89±0.11)，T组为(0.74±0.29)、(0.68±0.31)、(0.68±0.23)，T组ERK1/2与抗凋亡蛋白bcl-XL的基因表达水平较对照组下降；Western blot分析显示：Control组、NC1组、T组ERK1/2的灰度值分别为(85.42±3.11、86.25±4.25、66.36±4.25)，抗凋亡蛋白bcl-XL的灰度值为(82.57±3.71、79.52±3.78、46.85±4.52)。通过Annexin V-FITC/PI双染色的方法，在流式细胞仪上检测细胞凋亡显示高表达GalNAc-T14时U87MG细胞株早期凋亡与晚期凋亡的百分数分别为(7.74±1.23)%、(10.08±2.41)%，高于对照组(1.12±0.18)%、(0.51±0.14)%及NC1组(1.37±0.12)%、(0.90±0.08)%，差异有统计学意义(t＝3.417，P<0.05)。
结论GalNAc-T14通过抑制ERK1/2及bcl-XL的表达促进多形性胶质母细胞瘤细胞的凋亡。