固醇调节元件结合蛋白-2在软骨细胞退变过程中的表达及意义

• 作 者: 陶可 王斌 李儒军 柯岩 曾晖 林剑浩
• 机 构: 100044 北京大学人民医院骨关节科，关节炎诊疗中心,100044 北京大学人民医院骨关节科，关节炎诊疗中心,100044 北京大学人民医院骨关节科，关节炎诊疗中心,100044 北京大学人民医院骨
• 出 处: 国际免疫学杂志
• 发表日期: 2016年39期
• 关键词: Sterol regulatory element-binding proteins-2 Interleukin-1β Osteoarthritis Chond

目的

比较固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)在正常软骨、骨关节炎(OA)软骨中表达，探讨SREBP-2在软骨退变过程中的表达变化。

方法

正常软骨、OA膝关节软骨组织行番红素O染色、Mankin评分和抗SREBP-2免疫组化染色；正常软骨细胞随机分为对照组和白细胞介素(IL)-1β刺激组，四氮唑法(WST-1)法检测其增殖活力，实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测目的基因SREBP-2、SREBPs裂解激活蛋白(SCAP)、蛋白聚糖(aggrecan)和Ⅱ型胶原(collagen Ⅱ)mRNA表达。

结果

番红素O染色显示OA软骨组织表层粗糙，层次紊乱，染色变淡。OA组Mankin评分高于正常组(P<0.01)。正常软骨抗SREBP-2免疫组化染色为阴性，而OA组为阳性。正常P2代软骨细胞collagen Ⅱ染色阳性、抗SREBP-2染色阴性；而经IL-1β刺激后Ⅹ型胶原和SREBP-2染色阳性。WST-1检测IL-1β刺激组吸光度A值较对照组明显降低(P<0.05)。PCR结果表明，各IL-1β组SREBP-2与SCAP mRNA的表达量均高于空白对照组，且随时间延长而升高，其中24 h组为(2.115±0.671)、(1.767±0.711)；48 h组为(2.367±0.530)、(2.910±0.398)；72 h组为(3.184±0.224)、(2.830±0.512)(P<0.05)，差异均有统计学意义。相反，各组中aggrecan、collagen Ⅱ mRNA表达量随时间延长而降低，24 h组为(0.812±0.467)、(0.784±0.774)；48 h组为(0.529±0.439)、(0.626±1.100)；72 h组为(0.336±0.563)、(0.175±0.834)(P<0.05)，差异均具有统计学意义。

结论

IL-1β能抑制正常软骨细胞增殖和软骨细胞基质成分的表达，并诱导其出现退行性改变。在诱导退变的过程中，SREBP-2的表达与软骨关键基因的表达呈负向变化关系。