【摘 要】
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将质粒p ET30a(+)-Cry1C转入大肠杆菌进行表达,对其表达条件进行了优化,并评价了蛋白的表达和纯化效果。结果显示:最佳诱导时间、IPTG的终浓度和诱导温度分别为5h、0.6 mmol/L和2
【机 构】
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宁夏大学生命科学学院,上海市农业科学院生物技术研究所,上海市农业遗传育种重点实验室,上海师范大学生命与环境科学学院
【基金项目】
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上海市农委重大科技攻关项目[沪农科攻字(2009)第6-4号]
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将质粒p ET30a(+)-Cry1C转入大肠杆菌进行表达,对其表达条件进行了优化,并评价了蛋白的表达和纯化效果。结果显示:最佳诱导时间、IPTG的终浓度和诱导温度分别为5h、0.6 mmol/L和25℃。大多数的靶蛋白以包涵体形式表达,通过纯化和复性,最终获得高纯度有活性的靶蛋白。通过SDS-PAGE Western Blot、糖蛋白测定、LC MS/MS鉴定和杀虫试验表明:大肠杆菌中表达的Cry1C蛋白和转基因水稻的Cry1C蛋白具有实质等同性。
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