甲基-β-环糊精抑制AngII诱导肾小球系膜细胞增殖及TRPC6表达

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目的:探讨MβCD(甲基-β-环糊精)对AngⅡ诱导肾小球系膜细胞(GMC)TRPC6的表达及小窝(caveolae)在GMC增殖中的作用.方法:实验分为:空白对照组(Con组)、AngⅡ组、MβCD预处理组(MβCD组).根据预实验选定AngⅡ10-7 mol/l作用GMC 24 h作为AngⅡ组.MβCD组用10mM MβCD预处理GMC 1 h后,用10-7 mol/lAngⅡ刺激24 h.四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测GMC增殖,WesternBlot检测TRPC6蛋白,实时荧光定量PCR检测TRPC6 mRNA表达,免疫荧光检测TRPC6的分布.结果:AngⅡ组较Con组明显促进GMC增殖(P < 0.05),MβCD组明显抑制AngⅡ对GMC的增殖作用,抑制率为48.96%(P < 0.01).AngⅡ组TRPC6mRNA及蛋白水平均较Con组升高(P < 0.01,P < 0.05),而MβCD组TRPC6mRNA及蛋白水平均较AngⅡ组降低(P < 0.01).GMC OD值与TRPC6蛋白表达水平呈正相关( R = 0.907,P < 0.01).结论:AngⅡ诱导GMC增殖需要完整的小窝结构,TRPC6与GMC增殖密切相关.
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