论文部分内容阅读
摘 要:高中生物实验要用到几种重要的染色剂。而染色剂具有用量少,价格相对昂贵,有些易氧化,需现配现用等特点。在教学实践中巧用六穴点滴板,既巧妙地把它作为现配试剂的微小容器,又把它作为集解离、漂洗、染色为一体的多功能器皿。具有用药节省、使用方便、容易清洗等优点。
关键词:六穴点滴板;应用
人教版高中生物必修1集中了高中生物近60%的实验教学内容。其中至少有两个以上实验要用到几种重要的染色剂。如“观察DNA和RNA在细胞中的分布”要用到甲基绿和吡罗红染色剂,而且使用时需现配现用。另外甲基绿价格也不便宜,我校买到的市售价格是171元/克。又如“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”要对根尖进行解离、漂洗、染色等环节,使用的实验器皿较多,步骤较繁琐。根据染色剂价格相对昂贵,在实验操作中的用量少,有些需现配现用等特点。我们在实验仪器、试剂的使用上进行了大胆的改进和创新,巧妙地运用了六穴点滴板,使它既可作为现配试剂的微小容器,又可作为解离、漂洗、染色的多功能器皿,一板多用,一板多能。现把我们的使用经验与大家共同分享,望能抛砖引玉。
1 六穴点滴板在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”中的应用
人教版高中生物必修1“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中用到两种染色剂,分别是甲基绿和吡罗红。由于此染色剂需现配现用,价格相对昂贵,为了能达到“用多少,配多少”的目的,我们在配制和使用上做了思考和改进。
1.1 染色剂A液与B液的分别配制
①染色剂A液的两种配制方法
方法一:取吡罗红甲基绿粉1g,加入到100mL蒸馏水中溶解,然后用滤纸过滤,将滤液放入棕色瓶中备用。
方法二:取甲基绿2g溶于98mL蒸馏水中,取吡罗红G5g溶于95mL蒸馏水中。取6mL甲基绿溶液和2mL吡罗红溶液加入到16mL蒸馏水中,即为A液,放入棕色瓶中备用。
根据以上配制比例,各校可按一个年段的教学班数及学生数,计算好染色剂的取用量,避免浪费。如我校高一段有16个教学班,每班分50~56组,两张实验桌合并一横排,故每四个同学可共用一套A、B染色剂分装的试剂瓶。染色剂A液每瓶15~20mL即可。因此,取甲基绿1.2g,加蒸馏水定容至60mL;取吡罗红G1.0g加蒸馏水定容至20mL;接着把60mL甲基绿溶液和20mL吡罗红溶液加入到160mL蒸馏水中,即为总容积为240mL的A液,再分装成14瓶至规格为30mL的棕色滴瓶中备用。根据经验此量已满足于一个教学班一次的使用量,并不造成多余浪费。
②染色剂B液的配制
B液是一种缓冲液,由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16.4g,用蒸馏水溶解至1000mL备用;再取乙酸12mL,用蒸馏水稀释至1000mL备用。取配好的乙酸钠溶液30mL和稀释的乙酸20mL,加蒸馏水50mL,配成pH为4.8的B液。
1.2 吡罗红甲基绿染色剂的配制
由于吡罗红甲基绿染色剂是由A液、B液混合配制而成的。取A液20mL和B液80mL混合,即吡罗红甲基绿染色剂。故A液与B液配制的体积比是1:4,使用时现配现用。为了节省染色剂的使用量,避免过期作废,减少不必要的浪费。因此,这一步骤我们在实验课中实际上是在教师的指导下由学生自己完成的。
方法是:
首先,将配好的A液和B液分装于两个棕色滴瓶中,贴好标签备用。
第二步:用同一规格大小的胶头滴管将吡罗红甲基绿染色剂A液滴1滴于六穴点滴板中的任一穴中,并在同一穴中滴入B液4滴(即按体积比A液:B液=1:4的比例配制),用第三支干净的胶头滴管使两种染色剂充分混合,吡罗红甲基绿染色剂即配制完毕。并向学生强调注意滴管专用,不可混用。
第三步:洋葱鳞片叶内表皮的制片、水解、冲洗等步骤完成后,用第三支胶头滴管从穴中取新配制的吡罗红甲基绿染色剂2滴对标本进行染色,染色5分钟后即可盖片观察。
1.3 优点
使用六穴点滴板作为染色剂的配制容器,按配制的体积比例进行现配现用,具有用药节省、使用方便等优点,不失为一种好方法。这是我们在教学实践中产生的智慧和经验,仅供参考。
2 六穴点滴板在“观察根尖分生组织细胞有丝分裂”中的应用
观察根尖分生组织细胞的有丝分裂是必修1中的一个分组实验,其中解离、漂洗、染色要用到多个培养皿,存在几点不足:①培养皿底面积宽,解离和染色需倒入较多的药液,一个年段一个分组实验时间可能持续3~5天,液体易蒸发;②玻璃器皿粘上染液后难于清洗;③玻璃器皿使用个数多容易损坏。若能集中到一个仪器上使用,就可克服以上缺点。六穴点滴板是一种很好的替代器皿,具有用药节省、根尖容易夹取、操作方便、容易清洗等优点。
2.1 使用方法
第一步:在六穴点滴板的首穴滴入已配制好的解离液4~5滴,这一穴就作为根尖解离的容器。接着剪取已培养好的洋葱根尖2~3毫米置于这一穴中解离3~5分钟。
第二步:利用解离等待时间,分别往第2、3、4、5穴中滴入5~6滴清水。待根尖酥软后,用镊子夹取或解剖针移动根尖依次放入第2、3、4、5穴中漂洗十分钟。
第三步:漂洗10分钟后,往最后一穴中滴入质量浓度为0.02g/mL龙胆紫溶液2~3滴。再把漂洗后的根尖移入0.02g/mL的龙胆紫溶液一穴中进行染色3~5分钟。染色后再制片进行观察。
2.2 优点
在这个实验中,六穴点滴板集解离、漂洗、染色等功能于一体,既节省试剂的使用容量,又能大大减少实验仪器的使用数量,从而减少仪器的损耗。同时还具有根尖容易夹取,操作方便,容易清洗等优点。
2.3 改进展望
六穴点滴板若能加以改进效果更好。如把解离与染色的穴做成口径2cm,穴深0.5cm,漂洗的穴做成口径2.5cm,穴深0.5cm,并在恰当位置标注解离、漂洗1、漂洗2、漂洗3、漂洗4、染色等字样。改进后再加以批量生产,定会受到广大师生的欢迎。
在教学实践中,我们不断摸索、总结、创新,巧妙地把六穴点滴板应用于生物实验教学中,既降低了实验成本,又方便了操作步骤,收到了良好的教学效果。
关键词:六穴点滴板;应用
人教版高中生物必修1集中了高中生物近60%的实验教学内容。其中至少有两个以上实验要用到几种重要的染色剂。如“观察DNA和RNA在细胞中的分布”要用到甲基绿和吡罗红染色剂,而且使用时需现配现用。另外甲基绿价格也不便宜,我校买到的市售价格是171元/克。又如“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”要对根尖进行解离、漂洗、染色等环节,使用的实验器皿较多,步骤较繁琐。根据染色剂价格相对昂贵,在实验操作中的用量少,有些需现配现用等特点。我们在实验仪器、试剂的使用上进行了大胆的改进和创新,巧妙地运用了六穴点滴板,使它既可作为现配试剂的微小容器,又可作为解离、漂洗、染色的多功能器皿,一板多用,一板多能。现把我们的使用经验与大家共同分享,望能抛砖引玉。
1 六穴点滴板在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”中的应用
人教版高中生物必修1“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中用到两种染色剂,分别是甲基绿和吡罗红。由于此染色剂需现配现用,价格相对昂贵,为了能达到“用多少,配多少”的目的,我们在配制和使用上做了思考和改进。
1.1 染色剂A液与B液的分别配制
①染色剂A液的两种配制方法
方法一:取吡罗红甲基绿粉1g,加入到100mL蒸馏水中溶解,然后用滤纸过滤,将滤液放入棕色瓶中备用。
方法二:取甲基绿2g溶于98mL蒸馏水中,取吡罗红G5g溶于95mL蒸馏水中。取6mL甲基绿溶液和2mL吡罗红溶液加入到16mL蒸馏水中,即为A液,放入棕色瓶中备用。
根据以上配制比例,各校可按一个年段的教学班数及学生数,计算好染色剂的取用量,避免浪费。如我校高一段有16个教学班,每班分50~56组,两张实验桌合并一横排,故每四个同学可共用一套A、B染色剂分装的试剂瓶。染色剂A液每瓶15~20mL即可。因此,取甲基绿1.2g,加蒸馏水定容至60mL;取吡罗红G1.0g加蒸馏水定容至20mL;接着把60mL甲基绿溶液和20mL吡罗红溶液加入到160mL蒸馏水中,即为总容积为240mL的A液,再分装成14瓶至规格为30mL的棕色滴瓶中备用。根据经验此量已满足于一个教学班一次的使用量,并不造成多余浪费。
②染色剂B液的配制
B液是一种缓冲液,由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16.4g,用蒸馏水溶解至1000mL备用;再取乙酸12mL,用蒸馏水稀释至1000mL备用。取配好的乙酸钠溶液30mL和稀释的乙酸20mL,加蒸馏水50mL,配成pH为4.8的B液。
1.2 吡罗红甲基绿染色剂的配制
由于吡罗红甲基绿染色剂是由A液、B液混合配制而成的。取A液20mL和B液80mL混合,即吡罗红甲基绿染色剂。故A液与B液配制的体积比是1:4,使用时现配现用。为了节省染色剂的使用量,避免过期作废,减少不必要的浪费。因此,这一步骤我们在实验课中实际上是在教师的指导下由学生自己完成的。
方法是:
首先,将配好的A液和B液分装于两个棕色滴瓶中,贴好标签备用。
第二步:用同一规格大小的胶头滴管将吡罗红甲基绿染色剂A液滴1滴于六穴点滴板中的任一穴中,并在同一穴中滴入B液4滴(即按体积比A液:B液=1:4的比例配制),用第三支干净的胶头滴管使两种染色剂充分混合,吡罗红甲基绿染色剂即配制完毕。并向学生强调注意滴管专用,不可混用。
第三步:洋葱鳞片叶内表皮的制片、水解、冲洗等步骤完成后,用第三支胶头滴管从穴中取新配制的吡罗红甲基绿染色剂2滴对标本进行染色,染色5分钟后即可盖片观察。
1.3 优点
使用六穴点滴板作为染色剂的配制容器,按配制的体积比例进行现配现用,具有用药节省、使用方便等优点,不失为一种好方法。这是我们在教学实践中产生的智慧和经验,仅供参考。
2 六穴点滴板在“观察根尖分生组织细胞有丝分裂”中的应用
观察根尖分生组织细胞的有丝分裂是必修1中的一个分组实验,其中解离、漂洗、染色要用到多个培养皿,存在几点不足:①培养皿底面积宽,解离和染色需倒入较多的药液,一个年段一个分组实验时间可能持续3~5天,液体易蒸发;②玻璃器皿粘上染液后难于清洗;③玻璃器皿使用个数多容易损坏。若能集中到一个仪器上使用,就可克服以上缺点。六穴点滴板是一种很好的替代器皿,具有用药节省、根尖容易夹取、操作方便、容易清洗等优点。
2.1 使用方法
第一步:在六穴点滴板的首穴滴入已配制好的解离液4~5滴,这一穴就作为根尖解离的容器。接着剪取已培养好的洋葱根尖2~3毫米置于这一穴中解离3~5分钟。
第二步:利用解离等待时间,分别往第2、3、4、5穴中滴入5~6滴清水。待根尖酥软后,用镊子夹取或解剖针移动根尖依次放入第2、3、4、5穴中漂洗十分钟。
第三步:漂洗10分钟后,往最后一穴中滴入质量浓度为0.02g/mL龙胆紫溶液2~3滴。再把漂洗后的根尖移入0.02g/mL的龙胆紫溶液一穴中进行染色3~5分钟。染色后再制片进行观察。
2.2 优点
在这个实验中,六穴点滴板集解离、漂洗、染色等功能于一体,既节省试剂的使用容量,又能大大减少实验仪器的使用数量,从而减少仪器的损耗。同时还具有根尖容易夹取,操作方便,容易清洗等优点。
2.3 改进展望
六穴点滴板若能加以改进效果更好。如把解离与染色的穴做成口径2cm,穴深0.5cm,漂洗的穴做成口径2.5cm,穴深0.5cm,并在恰当位置标注解离、漂洗1、漂洗2、漂洗3、漂洗4、染色等字样。改进后再加以批量生产,定会受到广大师生的欢迎。
在教学实践中,我们不断摸索、总结、创新,巧妙地把六穴点滴板应用于生物实验教学中,既降低了实验成本,又方便了操作步骤,收到了良好的教学效果。