【摘 要】
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目的 分析Sestrin 1对动脉粥样硬化小鼠斑块内巨噬细胞极化的调控作用及对血管内皮炎性损伤的影响.方法 将40只ApoE-/-小鼠随机分为对照组、模型组、si-NC组和si-Sestrin 1组
【机 构】
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长江大学医学院,湖北省荆州市 434023;长江大学医学院,湖北省荆州市 434023;湖北省荆州市中心医院/长江大学第二临床医学院,荆州市 434000
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目的 分析Sestrin 1对动脉粥样硬化小鼠斑块内巨噬细胞极化的调控作用及对血管内皮炎性损伤的影响.方法 将40只ApoE-/-小鼠随机分为对照组、模型组、si-NC组和si-Sestrin 1组,对照组小鼠正常饲养,其余小鼠均采用高脂饮食法建立动脉粥样硬化模型.建模成功2周后,si-NC组和si-Sestrin 1组分别给予尾静脉注射携带对照序列和Sestrin 1干扰序列的RAW 264.7细胞,其他两组输入等量细胞培养液.末次输注后次日,分离各组小鼠胸主动脉,油红O染色后测量斑块总面积,并测定斑块内活性氧活性;分离斑块中的巨噬细胞,采用流式细胞仪测定巨噬细胞表面标志物CD64、CD197、CD163、CD206阳性率,实时定量PCR测定肿瘤坏死因子α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)的mRNA表达量,蛋白免疫印迹法测定Sestrin 1蛋白表达量.结果 (1)对照组、模型组、si-Sestrin 1组的斑块面积依次增加,斑块内活性氧活性依次升高,Sestrin 1蛋白表达量依次降低(均P0.05).(2)对照组、模型组、si-Sestrin 1组M1型巨噬细胞的表面标志物CD64和CD197阳性率、iNOS mRNA表达量依次升高,M2型巨噬细胞表面标志物CD163和CD206阳性率、IL-10和TGF-βmRNA表达量依次降低(均P0.05).结论 下调Sestrin 1可促进动脉粥样硬化斑块内巨噬细胞向M1型的极化,并由此参与血管内皮细胞的炎性损伤,这可能是它参与动脉粥样硬化进展的重要机制之一.
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+3、CD
+4、CD
+8、CD
+4/CD
+
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