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目的:建立一种痢疾志贺菌、沙门菌和单增李斯特菌的多重PCR诊断方法。方法:根据伤寒沙门菌VipR基因、痢疾杆菌侵袭性质粒抗原H(ipaH)基因和单增李斯特菌溶血素hlyA基因序列作为目的基因片段痢疾志贺菌、沙门菌和单增李斯特菌的特异性抗原基因序列,分别设计一对引物,优化各种工作条件,建立一种多重PCR诊断方法。结果:本法特异性好,敏感性可达104拷贝,整个实验过程在3 h～5 h内完成。结论:建立的方法在理论和实际应用上都有优越性,且一次可检测出三种病原菌,可用于临床诊断。