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［目的］探讨补充加氯控制旅客列车二次供水微生物污染的效果。［方法］对实验室条件下用脱氯自来水制在的人工污染大肠埃希氏菌水样及现场旅客列车水箱水进行二次补充加氯。分别用３，３’，５，５’－四甲基联葳胺分光光度法和半乳糖苷酶膜荧光分析法检测水中游离性余氯和总大肠菌群（ＴＣ）。［结果］实验室条件下脱氯自来水加氯后水肿游离性余氯≥０．０９ｍｇ／Ｌ，５ｍｉｎ可全部杀灭人工污染的大肠杆菌，列车水箱水经三种方式