联合抑制聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1及DNA依赖蛋白激酶催化亚单位增加KG-1α细胞对依托泊苷的敏感性

来源 :中国临床药理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wyn44298
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目的 观察联合抑制聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]及DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(catalytic sunbunit of the DNA-dependent protein kinase,DNA-PKcs)对依托泊苷(etoposide,VP-16)作用于急性髓系白血病KG-1α细胞的影响.方法 分别用特异性抑制剂奥拉帕尼(Olaparib,OLA)和Nu7441(NU)抑制PARP-1、DNA-PKcs.将KG-1α细胞设置成对照组、模型组、PARP-1抑制组(PARP-1 inhibition,VP-16+OLA)、DNA-PKcs抑制组(DNA-PKcs inhibition,VP-16+NU)、联合抑制组(combined inhibition,VP-16+OLA+NU).用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测联合用药对KG-1α细胞增殖抑制的影响;用高内涵荧光成像检测分析不同处理组的 γ-H2 AX在DNA双链断裂断裂位点的募集情况;用蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3和Cleaved PARP的表达情况.结果 对照组、模型组、PARP-1抑制组、DNA-PKcs抑制组和联合抑制组的增殖抑制 率 分 别 为(1.16±1.45)%,(23.88±3.15)%,(28.12±2.28)%,(17.21±0.89)%和(60.72±4.38)%;γ-H2 AX阳性细胞百分比分别为 γ-H2 AX阳 性 细 胞 百 分 比 分 别 为(1.24±0.07)%,(22.51±2.24)%,(24.55±3.29)%,(23.28±2.48)%和(40.55±1.61)%;Cleaved Caspase-3蛋白相对表达量分别为0.16±0.10,0.61±0.30,1.15±0.64,1.11±0.31和1.72±1.03;Cleaved PARP蛋白相对表达量分别为1.23±0.09,1.45±0.55,2.03±0.84,2.08±0.41和2.66±0.95.模型组分别与对照组、联合抑制组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 联合抑制PARP-1及DNA-PKcs能够在体外增加KG-1α细胞对依托泊苷的敏感性.
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