广宿主稳定表达载体pQMV和pGMP的构建

• 作 者: 胡玉琴 张杰 宋福平 束长龙 黄大昉
• 机 构: 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,中国农业科学院生物技术研究所
• 出 处: 农业生物技术学报
• 发表日期: 2004年2期
• 关键词: 绿色荧光蛋白基因 荧光假单胞菌 启动子 穿梭表达载体 稳定性 pQMV pGMP green fluorescence protein gene (gfp )
• 基金项目: 国家自然科学基金青年基金(No. 39900004),,国家重点基础研究发展规化(973)项目(No. 2001CB109005)资助

以Eschedchia coli高效表达载体pET-29a为基础，将广宿主载体pUCP19中稳定的假单胞菌(Pseudomonas)质粒DNA复制子和自行分离克隆的荧光假单胞菌(P.fluorescens)P303组成型表达启动子PP303插入其中，分别获得了重组载体pQMV(4．6kb)和pGMP(5．6kb)。它们均含有假单胞菌和大肠杆菌复制子、荧光假单胞菌内源强启动子，以及包含8～11个限制性内切酶多克隆酶切位点；此外，载体pGMP还含有绿色荧光蛋白基因gfp作为辅助检测标记。连续培养和继代培养测定