【摘 要】
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[目的]探讨微小RNA(microRNA,miRNA/miR)1908对肺癌细胞A549的细胞周期及靶基因的调控作用。[方法]通过慢病毒转染方法,上调A549细胞中miR-1908的表达水平,运用噻唑蓝法和流
【机 构】
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东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(编号:81472939,81673132);2016年度江苏省普通高校学术学位研究生科研创新计划(编号:KYZZ16_0138);江苏省科技厅2015年社会发展项目(编号:BE2015719);南京市科技计划项目(编号:201503006)
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[目的]探讨微小RNA(microRNA,miRNA/miR)1908对肺癌细胞A549的细胞周期及靶基因的调控作用。[方法]通过慢病毒转染方法,上调A549细胞中miR-1908的表达水平,运用噻唑蓝法和流式细胞技术检测miR-1908对A549细胞增殖、周期和凋亡的影响。应用DIANA-TOOLs及KEGG数据库对miR-1908进行生物信息学分析,探讨其可能参与的信号通路和潜在靶基因。应用RT-qPCR和Western blot技术检测miR-1908对预测靶基因mRNA和蛋白表达水平的调控。[结果]与阴性对照组相比,转染组上调miR-1908表达可引起A549细胞G2期阻滞,S期减少(P<0.05),对细胞增殖和凋亡无明显影响(P>0.05)。miR-1908主要参与MAPK信号通路的调控,蛋白磷酸酶5(PP5)基因为其重要的潜在靶基因。与阴性对照组相比,转染组上调miR-1908表达可引起PP5的蛋白表达增加(P<0.05),但其mRNA表达无明显改变(P>0.05)。[结论]miR-1908可能通过对PP5基因正向调控或间接调控影响A549细胞周期,研究结果加深了对miRNAs在肺癌细胞中的作用及其机制的理解,并为miRNAs在肺癌中的进一步研究提供线索。
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