【摘 要】
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目的利用自身淬灭探针技术建立敏感、特异、快速、价廉且能广泛应用的结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法。方法构建重组质粒PET-32a(+)-16s rRNA作为标准品,自行设计自身淬灭
【机 构】
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广东省中医院检验科; 中山大学附属第一医院;
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目的利用自身淬灭探针技术建立敏感、特异、快速、价廉且能广泛应用的结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法。方法构建重组质粒PET-32a(+)-16s rRNA作为标准品,自行设计自身淬灭探针,建立、优化定量PCR体系,并进行方法学评价及临床应用。结果所建立方法的线性检测范围为102～109copies/μL,灵敏度为1copy/μL,特异性为100%。高拷贝样品的天间CV为2.65%、批内CV为1.86%,低拷贝样品的天间CV为2.12%、批内CV为0.78%。该方法比培养方法更快速、灵敏。结论以自身淬灭探针技术为平台的结核分枝杆菌荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好,对结核病的早期快速诊断有较高价值。
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