【摘 要】
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目的 分离牛乳源性大肠埃希菌(E.coli)并进行PCR检测及耐药性分析.方法 根据GenBank上公布的牛源致病性大肠埃希菌基因序列,利用Primer5.0和DNAMAN生物信息学软件,根据该致病
【机 构】
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内蒙古民族大学生命科学学院,内蒙古通辽028043;内蒙古民族大学动物科技学院,内蒙古通辽0280432;内蒙古民族大学乳源性致病菌研究所,内蒙古通辽0280432
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目的 分离牛乳源性大肠埃希菌(E.coli)并进行PCR检测及耐药性分析.方法 根据GenBank上公布的牛源致病性大肠埃希菌基因序列,利用Primer5.0和DNAMAN生物信息学软件,根据该致病菌基因组序列16S～23SrRNA间隔区保守序列设计并合成1对引物,对牛乳中分离的大肠埃希菌进行基因扩增和序列测定,同时利用琼脂平板扩散方法分析阳性菌株的耐药状况.结果 大肠埃希菌基因PCR扩增产物为396 bp,与预期片段大小相符;测序结果与GenBank上公布的牛源大肠埃希菌(X80731.1)基因序列相似性为97.22％,与标准菌株大肠埃希菌(CVCC247)基因序列相似性为100％.分离菌株普遍对卡那霉素、氧氟沙星、氟哌酸高度敏感,对四环素、氨苄青霉素高度耐药.结论 成功分离出牛乳源大肠埃希菌菌株,该组分离菌对四环素和氨苄青霉素高度耐药,为进一步建立牛乳中致病性大肠埃希菌的分子检测方法及指导临床用药提供了依据.
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