乙肝病毒X基因慢病毒载体的构建和鉴定

• 作 者: 陈豪 李丹 林纳 黄月红 陈志新 王小众
• 机 构: 福建医科大学
• 出 处: 福建医科大学学报
• 发表日期: 2011年3期
• 关键词: 肝炎病毒 乙型 肝细胞 基因 病毒 遗传载体 质粒 慢病毒感染 慢病毒属 聚合酶链反应 hepatitis B virus hepatocytes gene

目的构建乙型肝炎病毒（HBV）X蛋白的重组慢病毒载体pRRLsincPPT-hPGK-X-IRES-eGFP-WPRE（pRRL-X）,并感染正常组织来源的人肝细胞HL-7702,以验证其在体外的感染效率。方法采用PCR技术扩增出HBV X基因的DNA片段,用IN-Fusion技术构建表达载体pRRL-X并鉴定,jet-PEI转染试剂与三质粒共转染293T细胞后浓缩、计算慢病毒颗粒的滴度;用慢病毒液感染正常组织来源的人肝细胞HL-7702,120 h后初步观察慢病毒颗粒的感染情况。Real-time PC