【摘 要】
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目的 获得豚鼠结膜炎衣原体(GPIC)噬菌体φCPG1衣壳蛋白Vp3基因及其蛋白.方法 提取φCPG1及其核酸,PCR扩增Vp3基因,双酶切后将其定位插入原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表
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目的 获得豚鼠结膜炎衣原体(GPIC)噬菌体φCPG1衣壳蛋白Vp3基因及其蛋白.方法 提取φCPG1及其核酸,PCR扩增Vp3基因,双酶切后将其定位插入原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表达质粒,转化入大肠埃希菌BL-21,并酶切分析、PCR扩增及测序鉴定,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)及Western印迹鉴定,胶回收纯化.结果 获得的Vp3基因片段经测序,长度为447 bp,检索确认其序列与GenBank一致.对重组质粒进行诱导表达,SDSPAGE和Western印迹均显示获得相对分子质量约25 000的GPIC噬菌体φCPG1衣壳蛋白Vp3,并得到了纯化蛋白.结论 成功表达了噬菌体φCPG1衣壳蛋白Vp3,为进一步研究其作用机制和临床应用奠定基础.
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