论文部分内容阅读
目的观察白花蛇舌草提取物(Hedyotis diffusa extract,HDE)对HaCaT细胞增殖、凋亡和炎症因子的影响,并探究可能的分子机理。方法实验分为3组:空白组不加表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和HDE处理,对照组只加EGF而不加HDE处理,白花蛇舌草组分别用25、50、100mg/mL HDE和EGF共培养。CCK-8法检测HaCaT细胞增殖情况,流式细胞仪检测HaCaT细胞生长周期和凋亡率,Western blot法测定Ki67、Bcl-xL、cIAP1、procaspase-3、cleaved caspase-3的蛋白表达,ELISA法检测HaCaT细胞培养基上清液中IL-6、IL-8、IL-10的浓度,Western blot检测NF-κB p65亚基磷酸化(p-p65)水平。结果与空白组比较,对照组HaCaT细胞吸光度及Ki67蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),p-p65、IL-6、IL-8水平升高(P<0.05,P<0.01),IL-10水平降低(P<0.01);与对照组比较,白花舌草组25、50、100mg/mL浓度时HaCaT细胞吸光度及Ki67蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),p-p65、IL-6、IL-8水平降低,IL-10水平升高(P<0.05,P<0.01);同时白花蛇舌草组各浓度组凋亡率较对照组增加(P<0.05,P<0.01)。对照组处于G1期的细胞数量百分比为52.85%,白花蛇舌草组25、50、100mg/mL浓度时分别是58.51%、73.12%和79.95%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与白花蛇舌草组25mg/mL比较,白花蛇舌草组50和100mg/mL处于G1期的细胞数量百分比及凋亡率升高(P<0.01),且白花蛇舌草组100mg/mL时处于G1期的细胞数量百分比及凋亡率高于白花蛇舌草组50mg/mL(P<0.05)。与对照组比较,白花蛇舌草组100mg/mL时Bcl-xL和cIAP1蛋白表达降低(P<0.01,);caspase-3总量变化差异无统计学意义(P>0.05),cleaved caspase-3表达升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HDE可能通过将HaCaT细胞阻滞在G1期而抑制其增殖,通过抑制Bcl-xL和cIAP1蛋白表达、提高cleaved caspase-3蛋白表达而促进HaCaT细胞凋亡,通过调控NF-κB而抑制HaCaT细胞炎症反应。