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摘要：运用奶牛隐性乳房诊断液、光学显微镜以及pH211酸度计测定乳汁中的pH值与体细胞的含量，以确定奶牛隐性乳房炎与牛乳中酸碱度的关系。结果表明，牛奶中pH的变化与奶牛体内体细胞与炎性细胞呈现正相关，即牛乳样本的正常值为6.4 - 6.6;当体细胞含量处于20万- 50万/mL时，牛乳pH维持在6.6 - 6.8;而当体细胞含有50万- 150万/mL时，则牛乳的pH为6.8 - 7.0;而体细胞含量在1 50万- 500万/mL，而此时牛孑LpH的变化至7.0 - 7.2;同时，当体细胞含量超过500万/mL时，此时牛乳的pH上升到7.2以上。
关键词：奶牛隐性乳房炎;体细胞;酸碱度;牛奶
中圖分类号：S854.4
文献标识码：B
doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.10.011
0 引言
相关研究表明，奶牛乳房炎的发病率为20%，而隐性乳房炎的患病率竞高达50%。近年，在集中养殖化的不断推广下，并且抗生素预防与治疗水平得到很大提升，我国大多数养殖场都实行严格的泌乳期与干乳期的抗生素预防与治疗，奶牛的隐性乳房炎检卅率极大降低，但奶牛的临床乳房炎的发生率与危害性并没有得到实质性的缓解。而且尽管革兰氏阴性菌的发生率有很大幅度下降，且无乳链球菌也在很大程度被消除，但乳房炎的整体危害还存在。因此，做好早期的诊断治疗是预防隐性乳房炎与减少临床性乳房病发病率的重要措施。而国际上公认牛乳中有50万/mL的体细胞，可基本确诊患隐性乳房炎，而牛奶中的pH值在很大程度上能反映出牛奶中体细胞的含量[1]。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验奶牛
试验选取的奶牛主要来白于本地奶牛饲养场，还有一些奶牛来白于我国蒙古、新疆等地。其中本地奶牛主要以初产为主，而蒙古、新疆等地情况比较复杂。
1.1.2 药品与仪器
我国本土生产的奶牛乳房炎诊断试剂、光学显微镜、pH211酸度计、染色液等。
2 方法
2.1 乳样收集
随机选取某个奶牛场的泌乳期的奶牛若干头，先用温水擦拭乳头，擦干后，再用0.1%新洁尔灭溶液的毛巾进行擦洗，然后用70%的酒精对奶牛的乳头与采集者的手指进行消毒处理，最后进行挤奶T作。在对牛乳进行收集时，要运用消毒灭菌后的试管，并且同时取2份，每份1O mL左右，1份放在专门的冰箱内进行保存，另外1份则立即做酒精阳性乳、pH的检测以及体细胞的初步测定。
2.2 酒精阳性乳检测
对试验采集到的乳样要在0.5 h内取其2-3 mL的乳汁，与等量的70%的酒精混合，如若有微细颗粒或者絮状凝块的乳样出现，则可以判断其为酒精阳性乳。根据相应的测定结果，选出酒精阳性乳的牛乳，测定其相应的pH值，并且检验其隐性乳房炎以及体细胞含量，比较酒精阳性乳与非酒精阳性乳的不同。
2.3 隐性乳房炎诊断
对于非酒精乳的乳样，使用培养皿取2-3 mL的乳样，并取等量的诊断液混合，静置1 -2 min，判定相应的结果。再根据相应的判定标准，分别记录好相应的试验结果，然后用pH211酸度计测定个乳样的pH值，并且计算相应区域内不同标准下的乳样值。
3 结果与分析
3.1 酒精阳性乳对牛乳pH值的影响
酒精阳性乳与非酒精阳性乳的奶牛隐性乳房炎的阳性检出率之间的差异并不十分显著。同时，酒精阳性乳与非酒精阳性乳之间的pH基本也相同，各个方面所测量的原始数据经过相应的实践分析后，发现彼此间的差异也不明显。经过显微镜染色镜检，2种乳样之间的体细胞种类并没有很大的变化。因此，酒精阳性乳与体细胞含量、种类、pH值变化并没有相应的联系，而反应出的则是酒精阳性乳与非酒精阳性乳彼此间能互相共存，由此说明乳房炎与酒精阳性乳是2种不同类型的临床病症，而通过pH的变化，可判定奶牛隐性乳房病对酒精阳性乳没有影响。
3.2 牛乳体细胞含量与pH值的关系
不同区域内牛乳pH平均值中，最小值为6.322，而最大值为7.413，可见牛乳的pH值通常处于6-7，而且它与乳汁的体细胞含量呈现正相关。在体细胞含量的不断增加下，其白细胞的相应比例也增加很多，而后通过显微镜进行镜检观察，奶牛隐性乳房病中嗜中性细胞为50% - 90%。因此，乳腺的炎症反应、白细胞数急增是牛乳体细胞含量增多的重要因素。另外，镜检技术与诊断试剂判定体细胞含量的结果大致一致。同样，进行抽样镜检的每个乳样体细胞含量，也与pH值的变化范围相契合。因此，奶牛乳房炎乳汁pH值与体细胞数量之间是正相关的，如牛乳样本的正常值为6.4 - 6.6;当体细胞含量处于20万- 50万/mL时，牛乳pH维持为6.6 - 6.8;而当体细胞含有50万- 150万/mL时，则牛乳的pH有6.8 - 7.0;而体细胞含量在150万- 500万/mL，此时牛乳pH的变化至7.0 - 7.2;同时，当体细胞含量超过500万/mL时，此时牛乳的pH竟然会上升7.2以上。
4 讨论
利用牛乳中pH值的变化，不仅能间接确诊奶牛的隐性乳房炎，而且在很大程度能反映出奶牛隐性乳房病的发病程度[2]。因此，在实际临床实践中，仅简单运用常规的pH试纸就能检测到隐性乳房病，并且还能在一定程度上反映群体的健康状况，可见其应用前景极为广阔。但其中也存在诸多不足，因为奶牛的代谢问题、其他疾病以及种族之间差异等因素的影响，使正常奶牛的体细胞数量也有不正常的现象。如当对pH为6.4 - 6.6与6.6 - 6.8的乳样进行相应的检验分析时，发现体细胞数量差异并不十分明显。因此，对于pH为6.4 - 6.6与6.6 - 6.8的牛乳，并不能只通过简单的pH试纸判断其是否为阳性，还需要通过进一步的显微镜镜检，才能得到较为准确的测定结果。
试验利用体细胞数量、pH值的大小作为判断是否患有隐性乳房病的依据，而且通过对牛乳体细胞镜检可知，在奶牛体质、细菌作用、毒力效果等作用的影响下，会导致乳腺组织炎症进一步加剧，增加血管的渗透性，而此时通过自身的调节，大量白细胞渗出，使体细胞数量急增，即大量白细胞数量增多。另外，在炎性反应不断加剧下，血液与牛乳之间的pH值的梯度差不断降低，使牛乳中pH值异常升高，逐渐趋向于血液的pH值。因此，通过pH检测奶牛乳房病的效果比用体细胞数量判断更加简单有效，而且运用pH值检测还能在很大程度上减少因胎次、年龄以及新陈代谢等客观因素而引起其他正常体细胞数量减少或增加，降低对检测结果m现误判情况的出现，使检测更加具备说服力与可信度[3]。
另外，刚从乳房挤出的牛乳中出现酒精阳乳与乳汁的pH值并没有太大关系，即酒精阳乳与隐性乳房病是2种截然不同类型的临床疾病。因此，在实际生产中，运用常用酒精试剂检验奶牛是否患隐性乳房病是极其不正确的检验方法。因为牛乳酒精阳性出现以下2种情况：1种是由于外在管理保存不当所致，使牛乳中微生物大量繁殖，乳糖分解成乳酸，进而牛乳酸度升高，显现出牛乳酒精阳性反应;另外1种则是由于奶牛自身新陈代谢异常，使牛乳本身的成分结构遭受到破坏，也出现同样的牛乳酒精阳性反应，但是牛乳中的酸度不升高，成为区分2种出现牛乳酒精阳性反应的指标。
5 结束语
做好早期的诊断治疗是预防隐性乳房炎与减少临床性乳房病发病率的重要措施。应用牛奶酸碱度变化可以确诊奶牛是否患隐性乳房炎，而且操作简单，值得推广。
参考文献
[l]李勇，葛秀国，窦忠英.奶牛隐性乳房炎研究进展[J].黄牛杂志，2013（ 29）：16-18.
[2]张中文，吴国娟，刘风华，等北京地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏实验[J].北京农学院学报，2014，17（ 40）：42-47
[3]胡松华.奶牛乳房炎抗生素防治失败原因探讨[J].中国兽医杂志，2014，38 （2）：18-20.
作者简介：李梦媛（1989-），女，兽医硕士，助理讲师，从事畜牧兽医教学工作。
马卓（1985-），男，硕士研究生，助理讲师，从事畜牧兽医教学T作。
关键词：奶牛隐性乳房炎;体细胞;酸碱度;牛奶
中圖分类号：S854.4
文献标识码：B
doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.10.011
0 引言
相关研究表明，奶牛乳房炎的发病率为20%，而隐性乳房炎的患病率竞高达50%。近年，在集中养殖化的不断推广下，并且抗生素预防与治疗水平得到很大提升，我国大多数养殖场都实行严格的泌乳期与干乳期的抗生素预防与治疗，奶牛的隐性乳房炎检卅率极大降低，但奶牛的临床乳房炎的发生率与危害性并没有得到实质性的缓解。而且尽管革兰氏阴性菌的发生率有很大幅度下降，且无乳链球菌也在很大程度被消除，但乳房炎的整体危害还存在。因此，做好早期的诊断治疗是预防隐性乳房炎与减少临床性乳房病发病率的重要措施。而国际上公认牛乳中有50万/mL的体细胞，可基本确诊患隐性乳房炎，而牛奶中的pH值在很大程度上能反映出牛奶中体细胞的含量[1]。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验奶牛
试验选取的奶牛主要来白于本地奶牛饲养场，还有一些奶牛来白于我国蒙古、新疆等地。其中本地奶牛主要以初产为主，而蒙古、新疆等地情况比较复杂。
1.1.2 药品与仪器
我国本土生产的奶牛乳房炎诊断试剂、光学显微镜、pH211酸度计、染色液等。
2 方法
2.1 乳样收集
随机选取某个奶牛场的泌乳期的奶牛若干头，先用温水擦拭乳头，擦干后，再用0.1%新洁尔灭溶液的毛巾进行擦洗，然后用70%的酒精对奶牛的乳头与采集者的手指进行消毒处理，最后进行挤奶T作。在对牛乳进行收集时，要运用消毒灭菌后的试管，并且同时取2份，每份1O mL左右，1份放在专门的冰箱内进行保存，另外1份则立即做酒精阳性乳、pH的检测以及体细胞的初步测定。
2.2 酒精阳性乳检测
对试验采集到的乳样要在0.5 h内取其2-3 mL的乳汁，与等量的70%的酒精混合，如若有微细颗粒或者絮状凝块的乳样出现，则可以判断其为酒精阳性乳。根据相应的测定结果，选出酒精阳性乳的牛乳，测定其相应的pH值，并且检验其隐性乳房炎以及体细胞含量，比较酒精阳性乳与非酒精阳性乳的不同。
2.3 隐性乳房炎诊断
对于非酒精乳的乳样，使用培养皿取2-3 mL的乳样，并取等量的诊断液混合，静置1 -2 min，判定相应的结果。再根据相应的判定标准，分别记录好相应的试验结果，然后用pH211酸度计测定个乳样的pH值，并且计算相应区域内不同标准下的乳样值。
3 结果与分析
3.1 酒精阳性乳对牛乳pH值的影响
酒精阳性乳与非酒精阳性乳的奶牛隐性乳房炎的阳性检出率之间的差异并不十分显著。同时，酒精阳性乳与非酒精阳性乳之间的pH基本也相同，各个方面所测量的原始数据经过相应的实践分析后，发现彼此间的差异也不明显。经过显微镜染色镜检，2种乳样之间的体细胞种类并没有很大的变化。因此，酒精阳性乳与体细胞含量、种类、pH值变化并没有相应的联系，而反应出的则是酒精阳性乳与非酒精阳性乳彼此间能互相共存，由此说明乳房炎与酒精阳性乳是2种不同类型的临床病症，而通过pH的变化，可判定奶牛隐性乳房病对酒精阳性乳没有影响。
3.2 牛乳体细胞含量与pH值的关系
不同区域内牛乳pH平均值中，最小值为6.322，而最大值为7.413，可见牛乳的pH值通常处于6-7，而且它与乳汁的体细胞含量呈现正相关。在体细胞含量的不断增加下，其白细胞的相应比例也增加很多，而后通过显微镜进行镜检观察，奶牛隐性乳房病中嗜中性细胞为50% - 90%。因此，乳腺的炎症反应、白细胞数急增是牛乳体细胞含量增多的重要因素。另外，镜检技术与诊断试剂判定体细胞含量的结果大致一致。同样，进行抽样镜检的每个乳样体细胞含量，也与pH值的变化范围相契合。因此，奶牛乳房炎乳汁pH值与体细胞数量之间是正相关的，如牛乳样本的正常值为6.4 - 6.6;当体细胞含量处于20万- 50万/mL时，牛乳pH维持为6.6 - 6.8;而当体细胞含有50万- 150万/mL时，则牛乳的pH有6.8 - 7.0;而体细胞含量在150万- 500万/mL，此时牛乳pH的变化至7.0 - 7.2;同时，当体细胞含量超过500万/mL时，此时牛乳的pH竟然会上升7.2以上。
4 讨论
利用牛乳中pH值的变化，不仅能间接确诊奶牛的隐性乳房炎，而且在很大程度能反映出奶牛隐性乳房病的发病程度[2]。因此，在实际临床实践中，仅简单运用常规的pH试纸就能检测到隐性乳房病，并且还能在一定程度上反映群体的健康状况，可见其应用前景极为广阔。但其中也存在诸多不足，因为奶牛的代谢问题、其他疾病以及种族之间差异等因素的影响，使正常奶牛的体细胞数量也有不正常的现象。如当对pH为6.4 - 6.6与6.6 - 6.8的乳样进行相应的检验分析时，发现体细胞数量差异并不十分明显。因此，对于pH为6.4 - 6.6与6.6 - 6.8的牛乳，并不能只通过简单的pH试纸判断其是否为阳性，还需要通过进一步的显微镜镜检，才能得到较为准确的测定结果。
试验利用体细胞数量、pH值的大小作为判断是否患有隐性乳房病的依据，而且通过对牛乳体细胞镜检可知，在奶牛体质、细菌作用、毒力效果等作用的影响下，会导致乳腺组织炎症进一步加剧，增加血管的渗透性，而此时通过自身的调节，大量白细胞渗出，使体细胞数量急增，即大量白细胞数量增多。另外，在炎性反应不断加剧下，血液与牛乳之间的pH值的梯度差不断降低，使牛乳中pH值异常升高，逐渐趋向于血液的pH值。因此，通过pH检测奶牛乳房病的效果比用体细胞数量判断更加简单有效，而且运用pH值检测还能在很大程度上减少因胎次、年龄以及新陈代谢等客观因素而引起其他正常体细胞数量减少或增加，降低对检测结果m现误判情况的出现，使检测更加具备说服力与可信度[3]。
另外，刚从乳房挤出的牛乳中出现酒精阳乳与乳汁的pH值并没有太大关系，即酒精阳乳与隐性乳房病是2种截然不同类型的临床疾病。因此，在实际生产中，运用常用酒精试剂检验奶牛是否患隐性乳房病是极其不正确的检验方法。因为牛乳酒精阳性出现以下2种情况：1种是由于外在管理保存不当所致，使牛乳中微生物大量繁殖，乳糖分解成乳酸，进而牛乳酸度升高，显现出牛乳酒精阳性反应;另外1种则是由于奶牛自身新陈代谢异常，使牛乳本身的成分结构遭受到破坏，也出现同样的牛乳酒精阳性反应，但是牛乳中的酸度不升高，成为区分2种出现牛乳酒精阳性反应的指标。
5 结束语
做好早期的诊断治疗是预防隐性乳房炎与减少临床性乳房病发病率的重要措施。应用牛奶酸碱度变化可以确诊奶牛是否患隐性乳房炎，而且操作简单，值得推广。
参考文献
[l]李勇，葛秀国，窦忠英.奶牛隐性乳房炎研究进展[J].黄牛杂志，2013（ 29）：16-18.
[2]张中文，吴国娟，刘风华，等北京地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏实验[J].北京农学院学报，2014，17（ 40）：42-47
[3]胡松华.奶牛乳房炎抗生素防治失败原因探讨[J].中国兽医杂志，2014，38 （2）：18-20.
作者简介：李梦媛（1989-），女，兽医硕士，助理讲师，从事畜牧兽医教学工作。
马卓（1985-），男，硕士研究生，助理讲师，从事畜牧兽医教学T作。