【摘 要】
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目的评估环状蛋白质精氨酸甲基转移酶5(circPRMT5)在结直肠癌发生、发展中的作用。方法收集2013年1月至2017年12月上海健康医学院附属嘉定区中心医院普外科行结直肠癌根治术患者96例。采用实时荧光定量PCR检测circPRMT5在结直肠癌组织中的表达水平；分析circPRMT5表达水平与结直肠癌患者年龄、性别、肿瘤最大径、肿瘤位置、病理分化、TNM分期、淋巴结转移等因素的相关性。将结直肠
【机 构】
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上海健康医学院附属嘉定区中心医院消化内科 201800,上海健康医学院附属嘉定区中心医院普外科 201800,上海健康医学院附属嘉定区中心医院消化内科 201800,上海健康医学院附属嘉定区中心医院消
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目的评估环状蛋白质精氨酸甲基转移酶5(circPRMT5)在结直肠癌发生、发展中的作用。
方法收集2013年1月至2017年12月上海健康医学院附属嘉定区中心医院普外科行结直肠癌根治术患者96例。采用实时荧光定量PCR检测circPRMT5在结直肠癌组织中的表达水平；分析circPRMT5表达水平与结直肠癌患者年龄、性别、肿瘤最大径、肿瘤位置、病理分化、TNM分期、淋巴结转移等因素的相关性。将结直肠癌细胞株SW620和LOVO按不同的处理方式分为对照组、circPRMT5-lenti组和circPRMT5-shRNA-lenti组，检测circPRMT5表达水平对SW620和LOVO细胞活性、凋亡、线粒体膜电位、迁移的影响。采用蛋白质印迹法检测circPRMT5表达水平对上皮钙黏蛋白、Slug、神经钙黏蛋白和波形蛋白表达的影响。采用Starbase V2.0软件预测circPRMT5的潜在靶miRNA。统计学分析采用Student t检验、方差分析和卡方检验。
结果实时荧光定量PCR结果显示，结直肠癌组织中circPRMT5表达水平高于癌旁组织(2.167±0.345比1.103±0.144)，差异有统计学意义(t＝26.847，P<0.01)，其表达水平与肿瘤最大径、TNM分期、淋巴结转移和远处转移显著相关(χ2＝6.010、10.971、5.321、6.272，P均<0.05)。circPRMT5表达上调可以促进SW620和LOVO细胞的增殖和迁移；circPRMT5表达下调可以抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，且降低细胞线粒体膜电位。蛋白质印迹结果显示，与对照组相比，circPRMT5-lenti组Slug、神经钙黏蛋白和波形蛋白表达均升高(分别为1.023±0.038比2.105±0.042，1.051±0.309比2.277±0.111，1.055±0.040比2.002±0.537)，上皮钙黏蛋白表达降低(2.074±0.214比0.627±0.023)，差异均有统计学意义(t＝31.817、22.065、14.536、9.148，P均<0.01)；circPRMT5-shRNA-lenti组Slug、神经钙黏蛋白和波形蛋白表达均降低(1.023±0.038比0.585±0.023，1.051±0.309比0.616±0.043，1.055±0.040比0.537±0.022)，上皮钙黏蛋白表达升高(2.074±0.214比2.756±0.148)，差异均有统计学意义(t＝－13.795、－14.252、－11.794、－13.116，P均<0.05)。Starbase V2.0软件预测共有21个miRNA与circPRMT5存在潜在结合位点，并且实时荧光定量PCR检测证实SW620和LOVO细胞中miRNA4735-3p、miRNA202-3p、miRNA326、let-7i-5p、miRNA4500与circPRMT5表达水平呈负相关。
结论circPRMT5是结直肠癌发生、发展中的重要促癌基因，在结直肠癌靶向药物研发中具有一定应用前景。
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