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目的建立定量检测抗百日咳毒素抗体(Antibody to Pertussis Toxin,Anti-PT)、抗丝状血凝素抗体(Antibody to Filamentous Haemagglutinin,Anti-FHA)和抗百日咳黏附素抗体(Antibody to Pertactin,Anti-Prn)的酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)方法。方法分别应用纯化的百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)和百日咳黏附素(Prn)作为包被抗原,百日咳血清抗体国际参考品为标准品,建立定量检测Anti-PT、Anti-FHA、Anti-Prn的ELISA方法。结果建立了三种定量检测ELISA方法,并进行方法学验证。结果显示,定量检测Anti-PT的ELISA方法的最低检测限度为1.31IU/ml(国际单位/毫升),批内和批间变异系数(Coefficient of Variability,CV)分别为9.99%和11.55%,回收率为97.19%;检测Anti-FHA方法的最低检测限度为1.02IU/ml,批内和批间CV分别为11.01%和12.76%,回收率为101.20%;检测Anti-Prn方法的最低检测限度为0.51IU/ml,批内和批间CV分别为9.00%和11.18%,回收率为107.83%。用建立的ELISA方法与国外同类方法对30份血清样本进行分析,检测结果差异无统计学意义。应用上述建立的三种ELISA方法,检测分析了三组份无细胞百日咳疫苗(Acellular Pertussis Vaccine,aP)基础免疫后免疫原性。结论所建立的百日咳血清抗体检测ELISA方法,准确度高和重复性好,无需特殊仪器,适合于一般实验室开展,可用于接种aP后血清学效果观察和百日咳流行病学研究。