【摘 要】
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目的对原有大鼠海马神经元原代培养方法进行改进,在获得数量多、纯度高、体外生长时间长的神经细胞的同时,简化操作流程、节省时间、减少污染。方法分离24h内出生的Wistar大
【机 构】
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重庆市儿科医学研究所儿童营养研究中心
【基金项目】
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基金项目：国家自然科学基金（30600495）
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目的对原有大鼠海马神经元原代培养方法进行改进,在获得数量多、纯度高、体外生长时间长的神经细胞的同时,简化操作流程、节省时间、减少污染。方法分离24h内出生的Wistar大鼠双侧海马,采用机械吹打法,以沉降法代替过滤制备单细胞悬液,细胞接种24h后培养液更换为添加B27的DMEM/F12无血清培养基,以后每周半量换液2～3次。用倒置相差显微镜观察细胞形态,利用神经元特异性标志物神经元特异烯醇化酶（NSE）鉴定神经细胞的纯度,并以钙影像仪测定KCl作用神经元后细胞的钙离子浓度变化,了解神经元的兴奋性。结果此简
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