【摘 要】
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目的 探讨联合应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)和纹状体条件培养液定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)分化为多巴胺能神经元的可能性.方法 1.BMMSCs
【机 构】
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山东大学齐鲁儿童医院,儿科研究所,济南,250022山东大学第二医院,血液学实验室,济南,250033;
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目的 探讨联合应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)和纹状体条件培养液定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)分化为多巴胺能神经元的可能性.方法 1.BMMSCs的分离培养:分离纯化健康成年Wistar大鼠BMMSCs进行传代培养2.纹状体条件培养液的制备:出生24 h内的新生Wistar大鼠,分离纹状体组织用于制备纹状体条件培养液.3.BMMSCs的诱导分化:取体外培养的第5代问充质干细胞,用含bFGF和EGF的预诱导液进行预诱导,24 h后去除顶诱导液,换用纹状体条件培养液进行诱导.4.倒置显微镜下观察细胞形态变化,并用细胞免疫化学技术检测细胞内神经元特异烯醇化酶(NSE)和酪氨酸羟化酶(TH)的表达.结果 大鼠BMMSCs经bFGF、EGF和纹状体条件培养液诱导后细胞胞体逐渐回缩成团,形成梭形,部分细胞可见突起伸出,类似神经元.细胞免疫化学检测,联合诱导后NSE阳性表达为(72.70±14.81)%,TH阳性表达为(34.50±15.93)%.结论 bFGF、EGF联合纹状体条件培养液体外可定向诱导大鼠BMMSCs分化为多巴胺能神经元.
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