酸性蛋白酶基因Asp在红曲霉中的同源表达及序列分析

• 作 者: 邱思佳 霍丹群 侯长军 唐玉明 于梦露 殷忠原 邓波 杨平
• 机 构: 重庆大学生物工程学院,四川省泸州市酿酒科学研究所,国家固态酿造工程技术研究中心泸州老窖股份有限公司
• 出 处: 食品工业科技
• 发表日期: 2016年7期
• 关键词: 红曲霉 酸性蛋白酶 同源表达 序列分析 Monascus acid protease homologous expression sequential
• 基金项目: 国家科技支撑计划（2014BAD07802）,四川省科技支撑计划（2010NZ0093）,酿酒生物技术及应用四川省重点实验室项目（NJ2011-03,NJ2014-03）,重庆大学大型仪器设备开放基金.

从红曲霉基因组中扩增出酸性蛋白酶基因Asp的编码区，构建其同源表达载体pBC-Hygro-Asp并导入到农杆菌GV3101备用。利用根癌农杆菌介导法将重组质粒导入红曲霉，并筛选获得Asp基因同源重组转化子，实现了酸性蛋白酶基因在红曲霉中的同源表达。转化子中酸性蛋白酶基因表达量是野生型菌株的3．30倍，能达到高产酸性蛋白酶的目的。对红曲霉酸性蛋白酶基因序列进行分析，结果显示该基因产物有两个天冬氨酸蛋白酶活性位点，为亲水性分泌蛋白，不参与信号转导，且与赤曲霉酸性蛋白酶有相同进化速率。