【摘 要】
:
目的 探讨蛋白酶体抑制剂MG132联合顺铂对食管鳞癌细胞的杀伤作用及其机制.方法 分别以顺铂(100 mg/L)、MG132(5μmol/L)及顺铂+MG132处理食管鳞癌EC9706细胞24h,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力,膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)细胞凋亡检测试剂盒定量检测细胞凋亡率,Westem blot检测凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋
【机 构】
:
450052郑州大学第一附属医院胸外科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州大学肿瘤分子外科研究所郑州市胸部肿瘤重点实验室,450052郑州大学第一附属医院胸外科河南省高等学校临床医学重点学科开
论文部分内容阅读
目的 探讨蛋白酶体抑制剂MG132联合顺铂对食管鳞癌细胞的杀伤作用及其机制.方法 分别以顺铂(100 mg/L)、MG132(5μmol/L)及顺铂+MG132处理食管鳞癌EC9706细胞24h,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力,膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)细胞凋亡检测试剂盒定量检测细胞凋亡率,Westem blot检测凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8、Caspase-3和核转录因子(NF)-κB的表达.结果 MG132可以抑制肿瘤细胞的增殖,增强顺铂对食管鳞癌细胞的杀伤作用,使细胞存活率从(68.19±3.41)%降低至(29.37±4.16)%(P<0.05).MG132联合顺铂处理组的细胞凋亡率为(68.45±2.58)%,明显高于单独处理组的(23.55±1.23)%和(25.87±2.07)%(P<0.01).联合用药组细胞Caspase-8、Caspase-3的表达水平高于顺铂处理组,但NF-κB较单独顺铂处理组明显下降(P<0.05).结论 MG132通过抑制肿瘤细胞增殖,促进凋亡,提高顺铂对食管鳞癌细胞的杀伤作用。
其他文献
目的 观察促血管生成素2(Ang2)单链抗体(ScFv-Ang2)对人肝癌血管生成及肿瘤生长的作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),各组分别添加血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF+ Ang2、VEGF+ Ang2+ ScFv-Ang2,通过HUVEC增殖测定、迁移实验、小管形成实验观察ScFv-Ang2在体外对HUVEC生物学行为的影响;建立荷人肝癌细胞株MHCC97的肝原位移植
目的 探讨异性核基质结合区结合蛋白-1(SATB1)短发夹核糖核酸(shRNA)对高表达SATB1的人胶质瘤细胞株U251和SHG44增殖的影响及其机制.方法 构建针对SATB1的shRNA重组质粒,采用电穿孔的方法转染至U251和SHG44细胞中,分为对照组、空载体转染组、重组质粒转染组,分别通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测各组细胞SATB1基因和蛋白的表达
目的 采用二维斑点追踪成像技术检测主动脉瓣置换前后左室收缩功能的变化.方法 选取因重度主动脉瓣狭窄行主动脉瓣置换的患者47例,根据术前左室射血分数(EF)分为A组(29例,EF> 50%)及B组(18例,EF< 50%),分别于术前1~3 d及术后1周行常规经胸超声心动图检查,采用二维斑点追踪成像技术测定手术前后两组患者左室壁各节段收缩期纵向应变及应变率,同时测定两组患者手术前后左室EF值及左室心
闭合复位髓内钉技术是治疗胫骨干骨折的首选方法.为了提高闭合复位的准确性,我们研制了胫骨骨折闭合复位手术牵引架,现报道如下.一、资料与方法1.一般资料:2010年6月至2012年11月,应用自制的胫骨骨折闭合复位手术牵引架,闭合复位髓内钉治疗胫骨骨折21例.近1/3骨折3例,中1/3骨折10例,远1/3骨折8例,其中多段骨折3例,粉碎骨折6例.伤后至手术时间平均3天(1 ~12d).2.器械介绍:胫
目的 观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)特异配体罗格列酮对肝星状细胞(HSC)表达基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)、TIMP-2的影响.方法 在培养的HSC株中加入不同浓度的罗格列酮(终质量浓度为5、10、15、20 μmol/L),于24h后收集细胞,利用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达水平.结果 TIMP-1 mRNA
目的 构建针对cortactin基因干扰的胃癌SGC-7901稳定细胞株.方法 设计3条针对皮质肌动蛋白(cortactin)基因的短发卡RNA(shRNA)序列以及l条对照序列,退火后插入到PLKO.1慢病毒质粒载体中,质粒构建完成后和辅助质粒psPAX2,PCMV-VSVG共转染HEK293T细胞,包装成慢病毒颗粒,感染胃癌SGC-7901细胞株,并使用嘌呤霉素筛选.最终筛选出3个细胞株,提取
目的 观察三磷酸腺苷结合转运家族蛋白4(ABCC4)在胆管癌细胞增殖和转移中的作用.方法 收集2010年6月到2012年6月病理检查确诊胆管癌39例,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测人胆管癌与正常胆管黏膜标本中ABCC4的含量;在人胆管癌细胞株中沉默ABCC4基因;噻唑蓝(MTT)法绘制生长曲线;克隆培养后进行统计.结果 人胆管癌细胞中ABCC4异常高表达,Western b
目的 通过RNA干扰技术下调VTCN1基因在人膀胱癌HT-1376细胞株中的表达,观察VTCN1基因表达下调后对膀胱癌细胞生物学行为的影响.方法 将针对VTCN1基因的小干扰RNA(siRNA)序列重组入真核表达载体中构建pU-VTCN1-siRNA,转染至膀胱癌HT-1376细胞株中,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测转染pU-VTCN1-siRNA后的HT
目的 观察靶向小干扰RNA (siRNA)对小鼠肺缺血/再灌注损伤(PIRI)时细胞凋亡及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的影响.方法 荧光标记法观察靶向siRNA在小鼠体内的分布并评估转染效率.C57BL/6J小鼠50只,随机分为5组(n=10):假手术组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、I/R+载体组(VR+ Vehicle组)、I/R+阴性对照组(I/R+ Contr
目的 探讨小鼠脑缺氧缺血性脑病(HIE)脑组织中水通道蛋白-9(AQP-9)的表达及意义.方法 低氧浓度环境下制作小鼠HIE模型,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测AQP-9mRNA的表达水平,免疫组织化学法检测AQP-9蛋白的表达量.结果 模型组各时间点AQP-9mRNA(灰度值最高值1.8223±0.1468)及AQP-9蛋白表达水平[最高值(26.745±2.875)%]均高于对照