【摘 要】
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目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体peDNA3，回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸（driP）70℃退火，构成T克
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院病毒研究室
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目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体peDNA3，回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸（driP）70℃退火，构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因（EGFP）和中国旱獭α干扰素基因（cwIFNA5）分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体，转化感受态细菌，挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞，荧光显微镜观察EGFP的表达，病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体，外源基因EGFP和cwIFNA
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