【摘 要】
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目的探讨腺病毒36型(Ad36)诱导分化的脂肪细胞中，长链非编码RNA(LncRNA)00602促进棕色化的可能作用。方法根据Ad36感染与否，将肥胖患者分为Ad36阴性组和Ad36感染组。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2组患者网膜脂肪组织中LncRNA00602 mRNA表达水平变化，并分析其与同组患者腰臀比、收缩压、舒张压、空腹血糖、三酰甘油等指标的相关性。采用HE染色检测Ad3
【机 构】
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新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室，省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室，乌鲁木齐 830011,新疆医科大学厚博学院，克拉玛依 834000,新疆医科大学基础医学院生物化学与分子
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目的探讨腺病毒36型(Ad36)诱导分化的脂肪细胞中，长链非编码RNA(LncRNA)00602促进棕色化的可能作用。
方法根据Ad36感染与否，将肥胖患者分为Ad36阴性组和Ad36感染组。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2组患者网膜脂肪组织中LncRNA00602 mRNA表达水平变化，并分析其与同组患者腰臀比、收缩压、舒张压、空腹血糖、三酰甘油等指标的相关性。采用HE染色检测Ad36阴性组和Ad36感染组网膜脂肪组织中脂肪细胞大小，qRT-PCR及Western印迹法检测2组患者网膜脂肪组织中解偶联蛋白1(UCP1)、PR结构域蛋白16(PRDM16)的mRNA及蛋白质表达水平。分离、培养人脂肪源性干细胞(hADSC)，利用Ad36诱导hADSC分化，并分为对照组和LncRNA00602敲低组，在敲低LncRNA00602后第0、2、4天，采用氟硼二吡咯(BODIPY)及线粒体红色荧光(Mito-Tracker Red)分别对细胞内脂滴和线粒体进行荧光染色，同时用qRT-PCR及Western印迹法检测UCP1、PRDM16表达水平的变化。
结果Ad36感染组中LncRNA00602基因表达水平高于Ad36阴性组(均P<0.05)，Ad36阴性组中LncRNA00602表达水平与以上临床指标相关性无统计学意义，而Ad36感染组LncRNA00602表达水平与血清空腹血糖、三酰甘油呈负相关(r分别为-0.522、-0.486，P<0.05)；HE染色显示，Ad36感染组平均脂肪细胞面积小于Ad36阴性组，同时UCP1、PRDM16基因表达水平均高于阴性组(均P<0.05)。在细胞水平，敲低LncRNA00602后第2、4天，LncRNA00602敲低组脂肪细胞的脂滴面积大于对照组，同时线粒体数量较对照组减少，差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)；与对照组相比，LncRNA00602敲低组脂肪细胞棕色化标志基因UCP1、PRDM16 mRNA和蛋白质表达水平均显著降低(均P<0.05)。
结论Ad36诱导的脂肪细胞分化中，LncRNA00602可能正向调控了UCP1、PRDM16的表达和脂滴的代谢变化，并引起脂肪细胞棕色化的发生。
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