大白菜葡萄糖磷酸变位酶同工酶的纯化及其分子性质

来源 :华北农学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:greathuhao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
首先对影响葡萄糖磷酸变位酶(PGM)稳定性的因素进行了比较研究,结果发现,在所有被检测的因子中,磷酸根对酶的保护作用最强,而Tris-盐酸则效果极差。在磷酸缓冲液中添加二硫苏糖醇、PMSF、葡萄糖和镁离子等可能的保持试剂未能进一步提高酶的稳定性。另外,pH对PGM酶的稳定性有较大影响,酸性pH不利于酶活性的保持,在pH8.0时酶最为稳定。因此,本实验对PGM同工酶的纯化均在pH8.0的磷酸缓冲液中进行。依次经过抽提、分步硫酸铵沉淀、SephadexG75柱层析以及二乙氨乙基纤维素柱高效液相色谱(DEAE-HPLC)等分离步骤,我们纯化了大白菜品种“白阳”黄化种苗中的3个葡萄糖磷酸变位酶(PGM)同工酶,并分别测定了同耐热相关PGM同工酶和与其自然电泳迁移率相近的另一同工酶的米氏常数(Km),比较了它们对37℃热处理的稳定性。结果表明,在米氏常数和热稳定性方面它们没有显著差别,因而推测PGM酶本身可能不是影响大白菜耐热性的主要因素 First of all, the factors influencing the stability of PGM were compared. The results showed that phosphate had the strongest protective effect on all the tested elements, while Tris-HCl showed very poor protection. The possible retention of reagents such as dithiothreitol, PMSF, glucose and magnesium ions in phosphate buffer failed to further increase enzyme stability. In addition, pH has a greater impact on the stability of PGM enzyme, acidic pH is not conducive to the maintenance of enzyme activity, the enzyme is the most stable at pH8.0. Therefore, in this experiment, the purification of PGM isozymes was carried out in phosphate buffer pH8.0. Followed by extraction, step-by-step ammonium sulfate precipitation, SephadexG75 column chromatography and diethylaminoethyl cellulose column high performance liquid chromatography (DEAE-HPLC) and other separation steps, we purified the Chinese cabbage varieties “white Yang” yellow Three glucose phosphoglucomutase (PGM) isozymes in seedlings were determined and the Michaelis constants (Km) of the same isozymes with heat-related PGM isoenzymes and with their similar natural electrophoretic mobility were determined, respectively Their stability to 37 ° C heat treatment. The results show that there is no significant difference in the Michaelis constant and the thermal stability, so it is speculated that the PGM enzyme itself may not be the main factor affecting the heat tolerance of Chinese cabbage
其他文献
自学医以来,我便觉得,做医生或许是某种“特权”.在这个去人性化的时代里,可以做点人性的事的“特权”.在这个人与人之间的关系愈发疏离的时代里,可以重新与人建立起关系的“
期刊
生物农药由于其高效、广谱、对人畜安全及生态环境相容等特点,前景十分广阔。本文简要介绍了目前国内生物农药剂型的研发现状,指出为了能使其更好的发挥作用,满足生产实践需要,生
本文围绕在赤霉素信号转导机制中,GA-GIDI-DELLA信号途径对近年来关于GA信号转导关键元件的研究成果进行了综述。
目的 分析血栓弹力图评价脑梗死患者使用阿司匹林、氯吡格雷及其联合应用抗血小板治疗的作用.方法 2018年1月到2019年12月,共纳入急性脑梗死患者120例,根据不同的用药方案进
2010年10月27日,印度尼西亚爪哇岛日惹市,在一个类似庞培城的场景中,一辆摩托车周围布满火山灰。据报道,自爪哇岛默拉皮火山10月26日开始喷发以来,火山灰和炽热的气体己造成1
期刊
<正>本文将从文化软实力发展的角度,比较世界城市伦敦、纽约和东京发展的共同点。本文所指的文化软实力涉及的指标主要有文化遗产(博物馆、图书馆等)、视觉艺术与表演艺术(剧
会议
悬浮种衣剂的稳定性是影响制剂贮存性能和应用效果的重要因素,其中抗聚结稳定性和悬浮稳定性是反映悬浮种衣剂物理稳定性的两个方面。大量研究结果表明,通过加入分散助剂吸附于
目的 探讨上消化道出血患者采用生长抑素联合奥美拉唑治疗的临床疗效.方法 选取2019年4月至2020年4月盘锦市人民医院收治的100例上消化道出血患者作为研究对象,随机分为对照
本文通过分析世界智库的发展状况及其主要功能体现,借鉴欧美国家智库的宏观管理体制及内部管理机制,提出推动中国智库管理的免征所得税、项目拨款、实行企业经营管理模式等建议
会议
加速产业结构调整和促进文化创意产业升级是进一步提升北京市文化软实力的关键举措.本文通过分析北京发展文化软实力的必要性和可行性,指出大力发展音乐创意产业,是
会议