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目的 克隆抗人膀胱癌单克隆抗体重链可变区基因(VH),并构建其原核表达载体。方法从能分泌抗人膀胱癌单克隆抗体的杂交瘤细胞BDI-1中提取总RNA,通过RT-PCR扩增出VHcDNA。用HindⅢ和XhoⅠ酶切纯化的RT-PCR产物和原核表达载体pET28a(+),在T4DNA连接酶作用下室温连接。重组质粒经酶切鉴定,阳性克隆测序并进行序列分析。结果扩增出VHcDNA片段,大小约为370bp,重组质粒的酶切鉴定结果与预期一致。VH基因序列长度为366bp,编码122个氨基酸。VH基因属于鼠免疫球蛋白重链11