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为了检测抗金龟子幼虫的转cry8Ca基因烟草杀虫蛋白的含量，对双抗夹心酶联免疫吸附法（DAS—ELISA）检测体系中的反应条件进行了优化。采用方阵法对血清抗体的反应浓度进行筛选，对提取液、包被液、封闭液和底物作用时间进行比较和优选，结果确定多克隆抗体浓度为1：3200，酶标结合物浓度为1：400，pH9．6碳酸缓冲液提取，pH7．4磷酸缓冲液包被，0．5％明胶．PBST封闭，TMB底物作用15min为最佳双抗夹心ELISA检测条件。通过这一检测体系，对转cry8Ca基因烟草植株进行检测，S12株系的Cry