探讨双糖链蛋白聚糖(BGN)对小鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤(EBI)中神经元凋亡的影响。
方法采用改良血管内穿刺法构建C57BL/6J雄性野生型小鼠SAH模型。(1)将48只小鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH 6 h组、SAH 12 h组、SAH 24 h组、SAH 48 h组、SAH 72 h组，每组8只。采用Western blotting及荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测各组小鼠脑组织中BGN蛋白及mRNA的表达水平。(2)将16只小鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH 48 h组，每组8只。采用免疫荧光双标染色检测各组小鼠脑组织中BGN在神经元中的表达情况。(3)将24只小鼠按随机数字表法分为假手术组、假手术+空载病毒组、假手术+BGN慢病毒组，每组8只，其中BGN慢病毒及空载病毒于假手术前7 d经侧脑室注射。采用qRT-PCR检测各组小鼠脑组织中BGN mRNA的表达水平。(4)将48只小鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH+空载病毒组、SAH+BGN慢病毒组，每组16只，其中BGN慢病毒及空载病毒于造模前7 d经侧脑室注射。采用改良加西亚评分及平衡木实验评估各组小鼠的神经功能，采用TUNEL染色检测各组小鼠脑组织中神经元凋亡情况，采用Western blotting检测各组小鼠脑组织中磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)及核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达水平。
结果(1)SAH 48 h组小鼠脑组织中BGN蛋白及mRNA的表达水平达高峰，与假手术组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)SAH 48 h组小鼠脑组织中BGN大量表达于神经元中。(3)与假手术+空载病毒组比较，假手术+BGN慢病毒组小鼠脑组织中BGN mRNA的表达水平明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。(4)与SAH+空载病毒组比较，SAH+BGN慢病毒组小鼠的改良加西亚评分、平衡木实验评分均明显升高[(6.125±1.246)分vs. (13.000±1.309)分；(1.125±1.126)分vs. (2.875±0.835)分]，神经元凋亡比例明显降低[(51.950±11.166)% vs. (31.938±7.705)%]，p-NF-κB/NF-κB比值明显降低(1.161±0.156 vs. 0.886±0.142)，差异均有统计学意义(P< 0.05)。
结论抑制BGN表达可有效减轻小鼠SAH后EBI中神经元凋亡，从而改善其神经功能。