【摘 要】
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目的 :分析半胱氨酸对变性pS2融合蛋白复性的影响。方法 :经半胱氨酸处理与不处理的纯化pS2融合蛋白与抗 pS2多抗血清及进口 pS2单抗于 37℃孵育 1h后 ,再进行酶联免疫吸附试
【机 构】
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北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所免疫室,北京大学基础医学院免疫学系
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目的 :分析半胱氨酸对变性pS2融合蛋白复性的影响。方法 :经半胱氨酸处理与不处理的纯化pS2融合蛋白与抗 pS2多抗血清及进口 pS2单抗于 37℃孵育 1h后 ,再进行酶联免疫吸附试验 (ELISA)和免疫组织化学试验 (IHC)。此二种pS2融合蛋白经 15 % (质量比 )SDS PAGE后进行Westernblotting分析。 结果 :ELISA、IHC、Westernblotting结果显示 ,用半胱氨酸处理pS2融合蛋白后 ,其抗原性明显提高 ,提示 pS2融合蛋白经剧烈变性复性后 ,pS2三叶草结构域二硫键绝大部分发生错配而导致其抗原性丧失。 结论 :在变性 pS2融合蛋白复性中半胱氨酸对二硫键正确配对起重要作用
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