【摘 要】
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目的:选用植物细胞表达轮状病毒结构蛋白,拟构建有效植物细胞表达系统。方法:利用PT-PCR扩增A组轮状病毒外壳蛋白VP4基因片段,经双酶切后与植物表达载体连接,转化感受态细菌TG1。利
【机 构】
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南京军区军事医学研究所2100002,东北师范大学遗传所
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目的:选用植物细胞表达轮状病毒结构蛋白,拟构建有效植物细胞表达系统。方法:利用PT-PCR扩增A组轮状病毒外壳蛋白VP4基因片段,经双酶切后与植物表达载体连接,转化感受态细菌TG1。利用地高辛标记探针进行斑点杂交检测,筛选出阳性克隆,拟用该克隆转化马铃薯细胞,研制新型轮状病毒疫苗。本研究还利用β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因转化马铃薯细胞。结果:A组轮状病毒SA11株VP4基因产物大小与设计相同,为960bp。在被检测的未知载体中,有四个显紫色斑,可判定其为带有VP4cDNA的转化载体。用肉眼或显微镜可到马
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