【摘 要】
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本研究应用ＰＣＲ方法，从小鼠杂交瘤细胞中扩增鼠抗人ＣＤ＿３，抗体重、轻链可变区基因，经ＤＮＡ接头连接后与噬菌粒ｐＣＡＮＴＡＢ５重组；转化大肠杆菌形成抗体可变区基因文库。通过文库的“抢救”、亲和筛选、再转染
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本研究应用ＰＣＲ方法，从小鼠杂交瘤细胞中扩增鼠抗人ＣＤ＿３，抗体重、轻链可变区基因，经ＤＮＡ接头连接后与噬菌粒ｐＣＡＮＴＡＢ５重组；转化大肠杆菌形成抗体可变区基因文库。通过文库的“抢救”、亲和筛选、再转染、克隆化及鉴定，得到高亲和力鼠抗人ＣＤ＿３噬菌体基因工程单链抗体。
In this study, PCR method was used to amplify the mouse anti-human CD_3, antibody heavy and light chain variable region genes from mouse hybridoma cells and ligated with DNA linker to recombine with the phagemid pCANTAB5; transformed into E.coli to form antibody variable region genes library. Through the library “rescue”, affinity screening, then transfected, cloned and identified to obtain high-affinity mouse anti-human CD3 phage engineered single chain antibody.
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