葡激酶在毕赤酵母中的表达及纯化

来源 :中国实用医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ttcj_008

【摘要】

：

目的探索葡激酶基因在毕赤酵母中的表达和纯化方法。方法根据毕赤酵母的偏性合成了葡激酶基因,克隆到分泌型酵母表达载体pPIC9K中,重组载体线性化后,转化毕赤酵母GS115,甲醇

【作者】

：

宋磊刘红军刘宁

【机构】

：

山东泉港药业有限公司

【出处】

：

中国实用医药

【发表日期】

：

2008年24期

【关键词】

：

葡激酶毕赤酵母表达和纯化

【基金项目】

：

山东省济南市科技发展基金;

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目的探索葡激酶基因在毕赤酵母中的表达和纯化方法。方法根据毕赤酵母的偏性合成了葡激酶基因,克隆到分泌型酵母表达载体pPIC9K中,重组载体线性化后,转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达。应用DEAE-Sepharose FF、Q-Sepharose FF和Sephacry1 S-200凝胶过滤层析法纯化表达产物,采用溶圈法对纯化产物进行生物学活性测定。结果葡激酶在毕赤酵母中GS115的表达量约站总蛋白的45%;表达产物经DEAE-Sepharose FF、Q-Sepharose FF和SephacrylS-

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