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目的：构建豆蔻酰化富丙氨酸激酶c底物（MARCKS）磷酸化位点（PSD）突变体，并探讨瞬时受体电位M8离子通道（TRPM8）及MARCKS在冷刺激诱导黏蛋白（MUC）5AC合成及胞吐过程中发挥的作用。方法：利用PCR克隆全编码MARCKS目的基因，并通过定点突变技术将PSD的4个丝氨酸突变为天冬氨酸编码基因。将野生型及突变体cDNA亚克隆至pcDNA3．0载体后用酶切及DNA测序鉴定。以TRPM8特异性阻断剂BCTC、重组突变质粒转染人气道上皮16HBE细胞为干预手段，用免疫荧光及ELISA检测二者对冷空