基于通用质粒标准品的实时荧光定量PCR检测组织因子剪接异构体F3tv1及F3tv2

• 作 者: 穆原 周红 胥亚 张晓蕾 王婷
• 机 构: 江苏大学基础医学与医学技术学院
• 出 处: 临床检验杂志
• 发表日期: 2012年7期
• 关键词: 组织因子 选择性剪接 引物末端延伸 实时荧光定量PCR tissue factor alternative splicing terminal prim
• 基金项目: 国家自然科学基金（30971301）,江苏省研究生创新计划（CXLX11_0606）.

目的建立基于通用质粒标准品的实时荧光定量PCR（qPCR）法检测人组织因子（TF）两种剪接异构体（F3tv1和F3tv2）。方法设计基因特异性上游引物与通用下游引物,通过引物末端延伸法将2种扩增产物进行序列简并,用于构建通用质粒标准品。用qPCR法检测人白血病细胞株THP-1、Jurkat及外周血单核细胞中F3tv1与F3tv2的表达,分析该法的线性范围与特异性。结果所建qPCR方法对F3tv1与F3tv2扩增特异,线性范围均为108～101copies/μL。THP-1与外周血单核细胞中F3tv1相对表