【摘 要】
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目的研究白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分(YDW11)对破骨细胞分化的抑制作用。方法 UPLC-MS法鉴定YDW11中化学成分后,MTT法分析其对RAW264. 7细胞活力的影响。100 ng/mL核
【机 构】
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上海中医药大学交叉科学研究院,上海中医药大学科技实验中心分析测试室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81001666,81573673,81773946);上海教委创新项目(13YZ048);上海教委优青项目(SZY07029);上海卫计委青年项目(20144Y0143)
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目的研究白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分(YDW11)对破骨细胞分化的抑制作用。方法 UPLC-MS法鉴定YDW11中化学成分后,MTT法分析其对RAW264. 7细胞活力的影响。100 ng/mL核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导RAW264. 7细胞7 d以建立破骨细胞模型后,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色考察TRAP阳性多核细胞数,相应试剂盒测定TRAP酶活性。QRT-PCR检测TRAP、树突状细胞-特异性跨膜蛋白(DC-STAMP)、活化T细胞核因子cl (NFATc1)基因表达,Western blotting检测核因子κB受体活化因子(RANK)、肿瘤坏死因子受体相关因子6 (TRAF6)、NFATc1、组织蛋白酶K蛋白表达,Taqman MicroRNA RT-PCR检测miR-155表达。结果 YDW11中有16种成分,鉴定出对羟基苯乙酮、野黄芩苷、木犀草素、芹菜素。与模型组比较,YDW11组(25、50μg/mL)阳性多核细胞数显著减少(P<0. 01),并对细胞活力无明显影响(P> 0. 05);呈剂量依赖性地显著抑制酶活性,TRAP、DC-STAMP、NFATc1基因表达,RANK、TRAF6、NFATc1、组织蛋白酶K蛋白表达(P <0. 05),并显著提高miR-155表达(P<0. 05)。结论 YDW11可通过上调miR-155表达、下调相关基因和蛋白表达抑制RANKL诱导的破骨细胞分化。
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