阿托伐他汀对瘦素诱导血管内皮细胞及平滑肌细胞增殖的作用

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目的研究阿托伐他汀对瘦素刺激的血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)和血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法 VECs、VSMCs的密度调整为1×105/m L接种于96孔培养板,每孔均为100μL,将细胞分为两组:(1)不同浓度瘦素(0、12.5、25、50、100 ng/m L)-VSMCs与(0、10、20、50、100 ng/m L)-VECs分别作用24、48、72 h,设150 ng/m L瘦素干预72 h为150 ng/ml瘦素组;(2)先用100 ng/m L瘦素干预细胞72 h,再加入各种浓度的阿托伐他汀(0、1、10、100μmol/L)共培养24 h,设单纯的100 ng/m L瘦素干预细胞72 h为100 ng/m L瘦素组;(3)同时,两组均设正常对照组。刺激细胞至时间点后,于每个孔各滴入噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)(10 mg/m L)10μL,持续培育4 h。弃培养液后加入200μL二甲基亚砜(DMSO),小心吹打均匀,完全熔化后于全自动免疫酶标仪中测定的波长为490 nm的吸光度,每组6孔,重复实验3次。结果瘦素刺激组VECs与VSMCs的增殖高于正常对照组,且随着瘦素作用时间延长,VECs与VSMCs表达也随之增加,在72 h末促增殖效应达峰值,并且瘦素浓度在0~100 ng/m L之间呈剂量依赖性关系。100 ng/m L与150 ng/m L瘦素的促增殖效应无明显差异。阿托伐他汀组VECs与VSMCs的促增殖效应低于正常对照组及100 ng/m L瘦素组,且随着阿托伐他汀作用时间的延长,VECs与VSMCs的增殖反而会降低,并且最佳浓度为100μmol/L。结论瘦素能促进VECs与VSMCs的增殖,在一定范围内呈剂量及时间依赖性关系。阿托伐他汀能抑制瘦素诱导VECs与VSMCs的促增殖效应。
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