GST pull-down技术验证CIPK7蛋白激酶与CBL1蛋白的相互作用

• 作 者: 黄聪琳 丁硕 姜华 安黎哲
• 机 构: 甘肃省中医院,兰州大学生命科学学院,甘肃省中医药研究院
• 出 处: 兰州大学学报(自然科学版)
• 发表日期: 2013年06期
• 关键词: CBL1蛋白 GST pull-down CIPK7蛋白 蛋白质相互作用

采用DNA重组技术,构建pGEX-4T-3-CIPK7和pET28-CBL1蛋白表达载体,转化大肠杆菌并诱导表达目的蛋白,利用亲和层析纯化法纯化GST标签、His标签融合蛋白,通过GST pull-down试验验证CIPK7与CBL1之间的相互作用.成功构建了CBL1和CIPK7的重组质粒,经诱导表达及纯化获得了可溶性GSTCIPK7和CBL1-His融合蛋白,GST pull-down试验证实了CBL1能够与CIPK7结合.CIPK7蛋白与CBL1蛋白之间存在直接的相互作用,为进一步研究蛋白激酶CIPK7的功能奠定了基础.