【摘 要】
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为建立高效快速的PRRSV NADC30-Like毒株荧光定量PCR(SYBR Green real-time PCR）检测方法，根据NADC30毒株Nsp2基因保守序列设计特异性引物，通过优化确定最佳反应条件，并进行灵敏
【机 构】
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四川农业大学动物医学院; 动物疫病与人类健康四川省重点实验室;
【基金项目】
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国家农业产业技术体系四川兽药创新团队专项(CARS-SVDIP)
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为建立高效快速的PRRSV NADC30-Like毒株荧光定量PCR(SYBR Green real-time PCR）检测方法，根据NADC30毒株Nsp2基因保守序列设计特异性引物，通过优化确定最佳反应条件，并进行灵敏度、特异性、重复性实验以及临床样品的检测。结果显示，标准品在10~7 copies/μL到10~2 copies/μL浓度范围内具有良好的线性关系，最低检测浓度为2.25×10~1 copies/μL；该方法与HP-PRRSV、PCV、PEDV、TGEV、PRV、CSFV、PoRV无交叉反应，批内和批间的变异系数（CV）小于1.9%，在临床样品的检测中较普通PCR有更高的检出率。本文建立了PRRSV NADC30-Like毒株荧光定量PCR检测方法，具有敏感性高、特异性强、稳定性好、准确度高和检测快速等优点，可用于PRRSV NADC30-Like感染的早期诊断、样品的快速检测与定量分析。
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