弓形虫pVAX1-SAG2真核表达质粒的构建及其诱导的小鼠免疫应答

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目的构建弓形虫主要速殖子表面抗原2(SAG2)编码基因真核表达质粒pVAX1-SAG2,并接种小鼠,分析其所诱导的免疫应答.方法以限制性内切酶EcoRⅠ与KpnⅠ双酶切从重组质粒pGEM/SAG2中获得SAG2目的基因片段,约592个bp,将其插入真核表达载体pVAX1多克隆位点,构建重组质粒pVAX1-SAG2,并转化大肠杆菌JM109,阳性克隆以双酶切与PCR法鉴定.大量提取纯化重组质粒pVAX1-SAG2,50μg肌肉注射小鼠左后腿内侧肌肉,3周后加强免疫一次;RT-PCR检测SAG2在小鼠肌肉中的
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