【摘 要】
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根据单核增生李斯特菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌0157:H7的特异性序列分别设计4对特异性引物,建立了一种快速检测上述4种常见食源性致病菌的多重PCR方法,并对反应
【机 构】
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上海师范大学,上海市农业科学院生物技术研究所,上海市农业遗传育种重点实验室,上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所,上海科立特农产品检测技术服务有限公司
【基金项目】
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上海市闵行区产学研项目(2013MH099);上海市科技新农重点攻关项目[沪农科攻字(2013)第3-2号]
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根据单核增生李斯特菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌0157:H7的特异性序列分别设计4对特异性引物,建立了一种快速检测上述4种常见食源性致病菌的多重PCR方法,并对反应体系中的模板、引物、rTaq酶、MgSO_4添加量以及退火温度进行了优化。结果显示:4对引物序列的特异性均较好,利用单重PCR对4种致病菌的灵敏度进行检测,其检测限均达到10~3copies/mL。多重PCR同时检测4种致病菌的灵敏度为10~3copies/ml,对人工污染猪肉中的4种致病菌的灵敏度检测为10~3cfu/mL。该检测方
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