Raf全长及氨基端、羧基端真核表达载体的构建和表达

• 作 者: 王卓敏 陈军 万海粟 刘红雨 朱文 肖文 范羽 李永文 孙丽
• 机 构: 四川大学华西医院肺癌分子生物学重点实验室,天津市肺癌转移与肿瘤微环境重点实验室
• 出 处: 中国肺癌杂志
• 发表日期: 2008年3期
• 关键词: RAF 基因重组 真核表达 Raf Gene recombination Eukaryotic expression
• 基金项目: 本研究受国家自然科学基金重点项目（No.30430300）,天津市科技职称计划重点项目（No.06YFSZSF05300）和国家自然科学基金（No.30500221,No.30500496）资助

背景与目的Raf是Ras—Raf—MEK—ERK信号转导通路中的关键分子，在多种人类肿瘤中存在高度活化，然而其生物学功能和详细调节机理目前尚未完全明了。本研究旨在构建人Raf基因全长（Raf-1），氨基端（N—Raf）及羧基端（C—Raf）真核表达载体，并观察其在293T细胞中的表达情况。方法通过PCR方法扩增Raf-1，N—Raf和C—RgH的片段，利用基因重组技术构建pCMV-Tag2b—Raf-1，pCMV—Tag2b—N—Raf和pCMV-Tag2b—C—R填核表达载体，并进行酶切和测序鉴定。鉴定