【摘 要】
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[目的]构建拮抗菌B96-II的启动子文库,为B96-II的绿色荧光蛋白标记提供试验基础.[方法] 提取拮抗菌B96-II的基因组DNA,以绿色荧光蛋白基因(gfp)为报告基因,以启动子探针pNW33
【机 构】
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山西大学黄土高原研究所,山西省农业科学院山西省农药重点实验室
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[目的]构建拮抗菌B96-II的启动子文库,为B96-II的绿色荧光蛋白标记提供试验基础.[方法] 提取拮抗菌B96-II的基因组DNA,以绿色荧光蛋白基因(gfp)为报告基因,以启动子探针pNW33N-gfp为载体,通过鸟枪法在E. coli DH5α中构建B96-II的启动子文库.[结果] 通过筛选获得了21个阳性克隆,编号为P1～P21,这些阳性克隆在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光.研究表明,在热激时间为90 s、用4 μl 酶连产物原液进行转化时,所得转化子数量最多,平均每平皿可得到167个转化子.[结论] 表达绿色荧光蛋白的B96-II启动子文库的成功构建为拮抗菌B96-II的绿色荧光蛋白标记和环境行为研究奠定了良好的基础.
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