【摘 要】
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目的 分析雷帕霉素对中波紫外线(UVB)诱导的人皮肤成纤维细胞光老化模型自噬及氧化应激的影响。方法 将人皮肤成纤维细胞HSF2细胞株分组培养:对照组;UVB照射组(A组);UVB+雷帕
【机 构】
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南阳市中心医院,河南南阳,473000;徐州市儿童医院,江苏徐州,221006;南阳医学高等专科学校第一附属医院,河南 南阳,473000
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目的 分析雷帕霉素对中波紫外线(UVB)诱导的人皮肤成纤维细胞光老化模型自噬及氧化应激的影响。方法 将人皮肤成纤维细胞HSF2细胞株分组培养:对照组;UVB照射组(A组);UVB+雷帕霉素0.1 mg/L组(B组);UVB+雷帕霉素1mg/L组(C组);UVB+雷帕霉素10mg/L组(D组)。分别采用β-半乳糖苷酶染色法和MDC染色法检测细胞衰老和自噬情况,采用Western blot分析细胞中自噬相关蛋白LC3B和Beclin1蛋白表达水平,检测细胞中ROS水平及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)水平。结果 UVB照射可引起HSF2细胞提前衰老,自噬水平降低,ROS水平升高及氧化应激。B组细胞衰老率、自噬阳性细胞比例及细胞中p62、LC3B和Beclin1蛋白表达水平与A组比较差异无统计学意义(P>0.05),但随雷帕霉素浓度升高C、D组细胞衰老率呈下降趋势(P<0.05),自噬阳性细胞比例和LC3B、Beclin1蛋白表达水平呈升高趋势(P<0.05),p62蛋白水平呈降低趋势(P<0.05);B组细胞中ROS水平及CAT、SOD、POD水平与A组比较差异无统计学意义(P>0.05),但随雷帕霉素浓度升高C、D组ROS和POD水平逐渐降低至正常水平(P<0.05),CAT和SOD水平逐渐升高至正常水平(P<0.05)。结论 雷帕霉素能够增加UVB诱导的人皮肤成纤维细胞光老化的自噬水平,减少细胞衰老,同时降低ROS水平,改善氧化应激水平。
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