Pin1真核表达载体的构建及鼻咽癌稳定表达细胞的鉴定

来源 :广东医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：manzhiyi

【摘要】

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目的构建Pin1真核表达载体并筛选鼻咽癌稳定表达细胞株。方法提取HEK293细胞RNA行逆转录,扩增Pin1基因编码区,将其克隆到真核表达载体pcDNA6B中,菌液PCR鉴定并测序;将成功克

【作者】

：

黄国良陆岩何志巍

【机构】

：

广东医学院中美肿瘤研究所

【出处】

：

广东医学院学报

【发表日期】

：

2013年1期

【关键词】

：

PIN1 鼻咽癌表达 Pin1 nasopharyngeal carcinoma expression

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目的构建Pin1真核表达载体并筛选鼻咽癌稳定表达细胞株。方法提取HEK293细胞RNA行逆转录,扩增Pin1基因编码区,将其克隆到真核表达载体pcDNA6B中,菌液PCR鉴定并测序;将成功克隆的质粒转染至CNE1细胞,杀稻瘟素筛选和Western Blot鉴定稳定表达Pin1细胞。结果成功扩增Pin1编码区,并克隆至真核表达载体pcDNA6B中;Pin1过表达载体转染至CNE1细胞并筛选稳定表达细胞后,Western Blotting检测结果显示Pin1表达水平明显增加。结论成功构建Pin1过表达载体并筛

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